[发明专利]链霉亲和素标记微球的生物素化抗体结合量的测定方法在审
| 申请号： | 202110871132.1 | 申请日： | 2021-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN113624957A | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 张尧锋;李因来 | 申请（专利权）人： | 杭州博岳生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/532;G01N21/76 |
| 代理公司： | 深圳紫晴专利代理事务所(普通合伙) 44646 | 代理人： | 梁彦 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亲和 标记 生物素 抗体 结合 测定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.链霉亲和素标记微球的生物素化抗体结合量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)生物素化抗体的制备：2mg的抗体用PBS缓冲液稀释至5mg/ml，加入一定量的sulfo-NHS-LC-Biotin，摇匀后室温反应1小时，透析纯化；
2)吖啶酯-生物素化抗体的制备：步骤1)中的生物素化抗体稀释至2mg/ml,加入一定量的吖啶酯的DMSO溶液，摇匀后室温避光反应2小时，避光透析纯化并用BCA法进行定量；
3)标准曲线的绘制：取吖啶酯-生物素化抗体，配制成不同浓度的溶液，分别为0ug/ml、2ug/ml、4ug/ml、6ug/ml、8ug/ml、10ug/ml、12ug/ml，各取10ul到化学发光专用的96孔板，然后各加100ul的激发液，振荡摇匀后放到Thermo Luminoskan化学发光仪中，通过仪器注射泵加入激发液后，读取发光值RLU；绘制吖啶酯-生物素化抗体加入质量-RLU关系曲线。
2.根据权利要求1所述的链霉亲和素标记微球的生物素化抗体结合量的测定方法，其特征在于，所述步骤1)和步骤2)的室温保持在20-30℃。
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