[发明专利]一种提高间接标记灵敏度的方法和试剂盒

权利要求书

1.一种抗原标记方法，其特征在于，所述方法包括步骤(ⅰ)配体标记纳米颗粒类标记物，(ⅱ)标记抗原标记纳米颗粒类标记物，(iii)向标记体系中补充加入标记了配体的纳米颗粒类标记物，(ⅳ)加入待检样品，检测待检抗体；其中，纳米颗粒类标记物与标记抗原之间的标记是通过抗原上的标签和标记在纳米颗粒类标记物上的可特异性识别该标签的所述配体相结合来完成的间接标记；

所述纳米颗粒类标记物包括纳米颗粒、胶体、有机纳米颗粒、磁性纳米颗粒、量子点纳米颗粒或稀土络合物纳米颗粒；

所述标签为选择以下的多肽或蛋白：His Tag、T7 Tag、S Tag、Flag Tag、HA Tag、GST融合蛋白、Trx融合蛋白、SOD融合蛋白、CKS融合蛋白、DsbA融合蛋白、MBP融合蛋白、CBD融合蛋白，或者为生物素；

所述配体包括针对标签的特异性抗体、与标签有亲和力的物质。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待检抗体包括但不限于艾滋病毒抗体、甲型肝炎病毒抗体、乙型肝炎病毒抗体、丙型肝炎病毒抗体、丁型肝炎病毒抗体、戊型肝炎病毒抗体、庚型肝炎病毒抗体、风疹病毒抗体、人巨细胞病毒抗体、单纯疱疹病毒1型抗体、单纯疱疹病毒2型抗体、狂犬病毒抗体、人类T淋巴细胞白血病病毒抗体、登革热病毒抗体、人乳头瘤病毒抗体、西尼罗河病毒抗体、森林脑炎病毒抗体、麻疹病毒抗体、流感病毒抗体、副流感病毒抗体、水痘病毒抗体、艾柯病毒抗体、柯萨奇病毒抗体、乙型脑炎病毒抗体、EB病毒抗体、腮腺炎病毒抗体、梅毒螺旋体抗体、包柔氏螺旋体抗体、沙眼衣原体抗体、肺炎衣原体抗体、鹦鹉热衣原体抗体、解脲脲原体抗体、肺炎支原体抗体、结核分枝杆菌抗体、幽门螺旋杆菌抗体、淋球菌抗体、疟原虫抗体、枯氏锥虫抗体、弓形虫抗体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胶体包括胶体金属、分散型染料和染料标记的微球、乳胶。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述胶体金属包括胶体金、胶体银、胶体硒。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述配体为链霉亲和素。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述补充加入标记了配体的纳米颗粒类标记物的添加量是标记体系定容体积的5％-30％。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述补充加入标记了配体的纳米颗粒类标记物的添加量是标记体系定容体积的7.5％-17.5％。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述补充加入标记了配体的纳米颗粒类标记物的添加量是标记体系定容体积的10％。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述标记体系使用的胶体金稀释液的组成包括20mM PB，150mM NaCl，1％BSA，0.1％Triton X-100，2％蔗糖，0.01％Proclin300。

10.权利要求1-9任一项所述的抗原标记方法制备得到的纳米颗粒类标记物。

11.一种检测试剂盒，其特征在于，其包括权利要求10所述的纳米颗粒类标记物。

12.权利要求1-9任一项所述的方法或权利要求10所述的纳米颗粒类标记物在制备抗体检测试剂盒中的应用。