[发明专利]一种硫酸酯酶响应的AIE纳米探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种硫酸酯酶响应的AIE纳米探针，其特征在于，其结构式如下式I所示：

2.一种硫酸酯酶响应的AIE纳米探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将2-甲基喹啉和碘乙烷溶解于无水乙腈中，在惰性气体保护下于搅拌反应，将反应混合物冷却至室温后，沉淀物真空过滤洗涤干燥得到化合物2；

(2)将化合物2溶解于乙醇中，然后加入丙二腈和乙醇钠反应，反应完成后，将沉淀物过滤，并洗涤得到化合物3；

(3)将化合物3和4-羟基苯甲醛溶解在含有哌啶的无水乙腈中，在惰性气体保护下反应，将反应混合物冷却至室温后，将溶剂减压蒸发后，残余物纯化得到化合物DQM-OH；

(4)向溶有DQM-OH的四氢呋喃溶液中滴加溶解在四氢呋喃溶液中的叔丁醇钠；加入三甲基铵三氧化硫共聚物反应；将溶剂从反应混合物中蒸发，残余物纯化得到化合物探针DQM-SULF；

其反应路线如下所示：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)将2-甲基喹啉和碘乙烷优选溶解于无水乙腈中，在氮气惰性气体保护下于85-90℃搅拌20-24h， 反应结束后，将反应混合物冷却至室温后，底部有大量沉淀物，用布氏漏斗进行真空过滤；固体粗产物用乙腈洗涤，无需进一步纯化，干燥过夜后，得到化合物2。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)将化合物2溶解于干燥的乙醇中，然后加入丙二腈和乙醇钠，在0-4℃下搅拌0.5-1h，然后在室温下再搅拌2-3h，反应完成后，将沉淀物过滤，并用乙醇洗涤，得到化合物3。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)将化合物3和4-羟基苯甲醛溶解在含有哌啶的无水乙腈中，在氮气保护下于85-90℃搅拌过夜，将反应混合物冷却至室温后，将溶剂减压蒸发后，残余物通过硅胶色谱柱纯化得到化合物DQM-OH。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)在20-22℃下，向溶有DQM-OH的四氢呋喃溶液中滴加溶解在四氢呋喃溶液中的叔丁醇钠，15-20min后，加入固体形式的三甲基铵三氧化硫共聚物，30-40min后，将溶剂从反应混合物中蒸发，残余物通过硅胶色谱柱纯化得到探针DQM-SULF。

7.一种权利要求1所述的硫酸酯酶响应的AIE纳米探针对硫酸酯酶的响应性检测中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述响应性检测的过程为：将向含有探针的反应体系中加入不同浓度的硫酸酯酶溶液，将该反应溶液快速混合后于孵育，孵育后取反应溶液转移至英比色皿中，测定其紫外吸收和荧光发射光谱。

9.一种权利要求1所述的硫酸酯酶响应的AIE纳米探针在细胞内源性硫酸酯酶的成像中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述成像的过程为：取对数生长期的4T1细胞进行消化、离心，配置成细胞悬液，将细胞悬液加入激光共聚焦培养皿中，分别用不同浓度的探针于共孵育，最后用激光共聚焦显微镜进行细胞成像。