[发明专利]一种用于口腔气味检测识别的方法

说明书

本发明涉及一种用于口腔气味检测识别的方法，采用固相微萃取结合气相色谱质谱检测的方法，包括以下步骤：1)利用呼气采样瓶对受试者漱口前的呼气进行收集；2)受试者漱口后，再用采样瓶对受试者呼气进行收集；3)采用固相微萃取技术分别对受试者漱口前后的呼气成分进行萃取；4)利用气相色谱质谱联用技术检测分析萃取得到的物质；5)统计分析漱口前后受试者呼气成分的差异，识别来源于口腔的物质。本发明的方法操作简单，无创安全，能够有效地检测识别口腔气味。

技术领域

本发明属于健康检测领域，具体涉及一种用于口腔气味检测识别的方法。

背景技术

呼气测试具有无创、便捷的优点，是幽门螺杆菌感染、哮喘等疾病诊断的主要临床手段。此外，呼气分析在癌症辅助诊断中也有诱人的应用前景，通过对呼气中特异性挥发性有机物(VOCs)的检测有望实现对癌症的筛查。通常，人体内源性VOCs随血液从器官流向肺部，经过气血交换后进入肺泡，最终通过呼气由口腔或者鼻腔排出体外。与鼻呼气相比，口呼气测试更方便，也是目前临床应用最常用的方式。然而，口腔本身也可能会产生一些VOCs，像食物/饮品残留、唾液、甚至口腔细菌都可能会对呼气成分产生影响。这些口腔挥发物对呼气VOCs存在着贡献，在研究呼气标志物时，需要考虑空腔挥发物的潜在干扰。一旦这些口腔挥发物被确定为呼气疾病标志物，将有可能对呼气诊断结果造成严重的影响，所以口腔气味的检测识别可以为疾病的呼气无创筛查提供参考。

目前，关于检测漱口前后人体呼气成分变化的研究较少，仅有的也只是针对呼气中若干VOCs进行靶向性的监测，尚无利用固相微萃取结合气相色谱质谱技术对口腔气味进行检测识别的报道。

发明内容

本发明的目的是：提供一种用于口腔气味检测识别的方法，利用固相微萃取结合气相色谱质谱技术，分别对受试者漱口前后的呼气成分进行检测，分析比较漱口前后呼气成分的差别，本发明的方法操作简便，无创安全，能够有效地确定来源于口腔的物质。

为解决上述问题，本发明公开了一种用于口腔气味检测识别的方法，采用固相微萃取技术结合气相色谱质谱联用的方法，包括以下步骤：

(1)利用呼气采样瓶对受试者漱口前的呼气进行收集：

利用采样瓶对呼气进行采集，气体体积为500-1000ml。

(2)受试者漱口后，再用采样瓶对受试者呼气进行收集：

受试者用室温清水按照统一方式漱口三次，每次漱口用水量50mL，再利用采样瓶对呼气进行采集，气体体积与漱口前采集的体积一致。

(3)采用固相微萃取技术分别对受试者漱口前后的呼气成分进行萃取：

采用65μm PDMS/DVB的固相微萃取纤维头，先老化固相微萃取的纤维头，老化温度200-260℃，老化时间20-40min，老化结束后将纤维头插入气体采样瓶对呼气成分进行萃取，萃取温度为37℃，萃取时间20-40min。萃取完成后将纤维头插入进样口，解析时间为30s-1min。

(4)利用气相色谱质谱联用技术检测分析萃取得到的物质：

萃取头插入进样口后，质谱开始检测，同时记录谱图。气相色谱质谱检测分析条件如下：

色谱条件：色谱柱TG-624SilMS(30m×0.32mm×1.8μm)；载气为高纯氦气(99.999％)，流速为1.5ml/min；采用不分流进样模式；进样口温度200-260℃，色谱柱升温程序是：初始温度40-50℃，保持1min，然后以5℃/min升至180-200℃，并保持2min。

质谱条件：传输线温度200-260℃；离子源温度200-260℃；EI电子轰击能量为70eV；采用全扫描模式，质量扫描范围45-300amu。

(5)统计分析漱口前后受试者呼气成分的差异，识别来源于口腔的物质：