[发明专利]一种新型的抗肿瘤转换受体T细胞

说明书

本发明公开了一种新型的抗肿瘤转换受体T细胞，属于肿瘤的免疫治疗领域。本发明的新型抗肿瘤转换受体T细胞，其核心在于表达一种人工重组的受体蛋白，该受体蛋白依次由下列片段构成：(1)靶向细胞膜的信号肽，(2)抗PD‑L1单链抗体段，(3)CD28跨膜及胞内段；所述部分(2)的序列如SEQ ID NO.5～8任一所示。本发明的抗肿瘤转换受体T细胞能将癌细胞表面的PD‑L1抑制信号转化为激活信号，激活T细胞，发挥免疫治疗作用。

技术领域

本发明属于肿瘤的免疫治疗领域，具体涉及一种新型的抗肿瘤转换受体T细胞。

背景技术

近年来，细胞过继免疫治疗(adoptive cellular immunotherapy,ACI)在血液系统肿瘤和实体肿瘤治疗中的应用研究引起了人们的普遍关注。特别是CAR-T(chimericantigen receptor T cell)在血液系统恶性肿瘤的临床治疗取得显著疗效，比如靶向CD19的CAR-T已经批准用于治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)和复发或难治型大B细胞淋巴瘤。然而，CAR-T技术针对实体瘤无法取得与血液肿瘤同样的疗效，其原因是实体瘤具有更为复杂的免疫抑制微环境，包括乏氧、低营养的代谢环境、PD-L1/PD-1等介导免疫抑制的通路等。

目前以PD-1和PD-L1为靶点的免疫检查点抑制剂药物在临床上获得重大进展，通过阻断PD-1和PD-L1免疫检查点通路，恢复T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。但是由于晚期肿瘤患者T细胞的数量有限，并且T细胞杀伤肿瘤细胞时缺少共刺激信号，导致T细胞在杀伤肿瘤细胞时因耗竭而死亡，因而大大限制了PD-1和PD-L1为靶点的抗体药物的临床疗效。

研究一种可以增强T细胞的增殖和扩增能力，适用于实体瘤治疗的产品具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的问题是：提供一种新型的抗肿瘤转换受体T细胞(PDL1/CD28 T细胞)及其制备方法和应用。转换受体T细胞可通过与PDL1结合来传递激活信号(来自转换受体下游的CD28分子)而不是抑制信号，进而逆转PDL1通路对T细胞的免疫抑制，进一步增强T细胞的杀伤能力和增殖活性。

本发明技术方案如下：

一种PD-L1抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.5～8任一所示。

一种基因片段，它编码氨基酸序列如SEQ ID NO.5～8任一所示蛋白。

如前述的基因片段，所述基因片段的序列如SEQ ID NO.1～4任一所示。

一种抗肿瘤转换受体，其序列依次包括如下4部分：

(1)靶向细胞膜的信号肽段；

(2)抗PD-L1单链抗体段；

(3)CD28跨膜段；

(4)CD28胞内段；

所述部分(2)的序列如SEQ ID NO.5～8任一所示。

如前述的抗肿瘤转换受体，所述部分(2)的序列如SEQ ID NO.5所示。

如前述的抗肿瘤转换受体，所述部分(1)的序列如SEQ ID NO.15所示；

和/或，所述部分(3)的序列如SEQ ID NO.17所示；

和/或，所述部分(4)的序列如SEQ ID NO.18所示。

如前述的抗肿瘤转换受体，所述部分(2)和部分(3)之间还有连接肽段，优选地，所述连接肽段序列如SEQ ID NO.16所示。

如前述的抗肿瘤转换受体，序列如SEQ ID NO.14所示。

编码前述抗肿瘤转换受体的基因片段。