[发明专利]一种人MICA/Bα3区水解相关的抗原表位、针对该表位的抗体及其应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，公开了一种人MICA/B α3区水解相关的抗原表位、针对该表位的抗体及其应用。该抗原表位包括如SEQ ID NO:1所示或与其同源性在83%以上的氨基酸序列。本发明的抗原表位广谱存在于高度同源的MICA/B α3区的水解酶作用位点，可作为优势抗原表位制备出针对该表位的特异性抗人MICA/B α3区抗体。该表位与其特异性抗体结合后能够阻断MICA/B α3区水解，抑制细胞膜表面MICA/B脱落，从而增强NK细胞NKG2D受体介导的ADCC杀伤作用，在预防和治疗MICA/B+癌症或MICA/B相关的免疫性疾病中具有应用价值。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种人MICA/Bα3区水解相关的抗原表位、针对该表位的抗体及其应用。

背景技术

NK细胞作为先天免疫的重要一员，在机体的抗肿瘤免疫反应中发挥第一道防线的关键作用，其可通过胚系编码模式识别肿瘤细胞，分泌穿孔素、颗粒酶B从而引起细胞杀伤效应。NKG2D受体是NK细胞的主要激活性受体，在几乎所有的NK细胞上都有表达，无需致敏即可直接与相应配体(NKG2DLs)结合而发挥作用。在基因组损伤的应激状态下，肿瘤细胞表面NKG2DLs表达上调，其中主要组织相容性复合体I类链相关蛋白(MIC)是一类重要的活化配体。

MIC基因座共有MICA-MICG七个成员，仅MICA和MICB基因可编码功能蛋白，且编码的蛋白MICA和MICB具有90％同源性，结构与HLA-I类分子相似，包括三个胞外区(α1、α2、α3)、一段跨膜区和短胞质尾区。位于膜远端的MICA/Bα1和α2区通过与NKG2D形成的同源二聚体高亲和力结合(亲和力约为0.5-1nM)，激活NK细胞，发挥免疫监视和杀伤肿瘤等一系列抗肿瘤免疫功能。而研究发现随着肿瘤生长增殖，MMPs家族中的MMP2、MMP9、MMP14和ADAMs家族中的ADAM9、ADAM10、ADAM15、ADAM17等多种金属蛋白酶均可切割MICA/Bα3区的水解位点，形成的可溶性MICA/B(sMICA/B)会封闭膜型MICA/B与NKG2D的结合位点并介导受体内吞来逃避免疫细胞的杀伤。因此上调肿瘤细胞表面MICA/B分子的表达，有效增强肿瘤细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性，从而逆转肿瘤免疫逃逸反应是当前开发肿瘤免疫治疗的一个重要策略。

由于作用于MICA/Bα3区的水解酶众多，影响水解酶活性的因素多种多样，且这些酶也参与了正常细胞的生理功能，因此应用小分子酶特异性抑制剂来抑制MICA/B的脱落在临床上并不可取。尽管MICA/B基因具有高度多态性，仅MICA的等位基因目前就已发现100余个，但MICA/B的α3区高度同源，对此，开发出靶向MICA/Bα3区的特异性抗体、阻碍多种水解酶的作用位点是一种有效可行的治疗手段。

在此基础上，鉴定出MICA/Bα3区水解相关的抗原表位是当前的首要任务，获得的该表位序列可用于制备多肽-载体蛋白偶联物，进而作为优势抗原开发表位特异性抗体，由此简化了功能性抗体的筛选流程，节约了制备成本，为今后高通量、规模化生产治疗性抗人MICA/Bα3抗体药物提供了技术平台。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种人MICA/Bα3区水解相关的抗原表位、针对该表位的抗体及其应用。本发明的抗原表位广谱存在于高度同源的MICA/Bα3区的水解酶作用位点，可作为优势抗原表位制备出针对该表位的特异性抗人MICA/Bα3区抗体；该表位与其特异性抗体结合后能够阻断MICA/Bα3区水解，抑制细胞膜表面MICA/B脱落，进而增强NK细胞NKG2D受体介导的ADCC杀伤作用，在预防和治疗MICA/B+癌症或MICA/B相关的免疫性疾病中具有应用价值。

本发明的具体技术方案为：

第一，本发明提供了一种人MICA/Bα3区水解相关的抗原表位，包括如SEQ ID NO:1所示或与其同源性在83％以上的氨基酸序列。