[发明专利]用于检测人血中AEP蛋白水平的化学发光免疫检测试剂盒

说明书

一种用于检测人血中AEP蛋白水平的化学发光免疫检测试剂盒，包括：酶标液、AEP标准品、包被抗AEP单克隆抗体的免疫磁珠、稀释液、化学发光底物和浓缩洗涤液。本发明使用化学发光免疫分析技术，解决了对临床快速检测病人血液内AEP蛋白水平的需求，能够实现高灵敏度，重复性好，自动化程度高，操作便捷地检测AEP的水平，更适合临床POCT检测时，短时间内高灵敏度地检测一定数量的病人样品的需求。为临床快速检测AEP水平提供有力帮助。

技术领域

本发明涉及的是一种化学检测领域的技术，具体是一种用于检测人血中天冬酰胺内肽酶(Asparaginyl Endopeptidase，AEP)水平的化学发光免疫检测试剂盒。

背景技术

现有ELISA方法，抗原，抗体的结合反应是在固相(ELISA板反应孔)表面进行的，该方法操作繁琐，灵敏度低于化学发光，重复性差，且检测用时相比化学发光长。

发明内容

本发明针对现有AEP的ELISA试剂盒，操作繁琐，且不适合大规模临床快速检测的不足，提出一种用于检测人血中AEP蛋白水平的化学发光免疫检测试剂盒，使用化学发光免疫分析技术，解决了对临床快速检测病人血液内AEP蛋白水平的需求，能够实现高灵敏度，重复性好，自动化程度高，操作便捷地检测AEP的水平，更适合临床POCT检测时，短时间内高灵敏度地检测一定数量的病人样品的需求。为临床快速检测AEP水平提供有力帮助。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及一种AEP酶促化学发光免疫检测试剂盒，包括：酶标液、AEP标准品、包被抗AEP单克隆抗体的免疫磁珠、稀释液、化学发光底物和浓缩洗涤液。

所述的酶标液中含有辣根过氧化物酶标记的AEP单克隆抗体，该AEP单克隆抗体为兔抗或鼠抗，靶点为D6S4H。

所述的AEP标准品，其溶液浓度采用但不限于：0.01μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL。

所述的化学发光底物液包括：辣根过氧化物酶底物溶液A液与B液，即发光增强剂和发光底物为HRP酶的底物。使用时将A液与B液混合，再与磁珠孵育1分钟即可。

所述的稀释液为含0.3-0.5M NaCl的50mM的磷酸盐缓冲液。

所述的浓缩洗涤液为20倍浓缩液，是pH值为7-8，含有终浓度为0.01-0.1％Proclin300，0.5-1.5％吐温-20和0.01-0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，使用时用去离子水稀释至1倍洗涤液。

所述的包被抗AEP单克隆抗体的免疫磁珠，即含有标记有抗AEP单克隆抗体的磁珠，其具体通过将磁珠经活化剂活化后，与超滤后的抗AEP单克隆抗体在MEM溶液中偶联，后通过终洗液清洗后得到。

上述AEP酶促化学发光免疫检测试剂盒具体组分含量为：每升包含酶标液20mL、包被抗AEP单克隆抗体的免疫磁珠5mL、AEP标准品1.5mL、稀释液100mL、化学发光底物A液50mL、化学发光底物B液50mL、浓缩洗涤液20mL，余量为水。

本发明涉及上述AEP酶促化学发光免疫检测试剂盒的应用，将其用于检测人血中AEP蛋白水平，即通过将抗AEP单克隆抗体包被在磁珠表面，与样品中的AEP结合后，再与酶标AEP单克隆抗体试剂结合，形成固相-抗体-AEP抗原-酶标抗体夹心免疫复合物，通过加入发光底物后检测发光强度，对应标准曲线得到AEP含量。