[发明专利]一种高效生物转化污染土壤有机结合态镉的菌株及应用在审
| 申请号： | 202110791597.6 | 申请日： | 2021-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN113430138A | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 刘宏伟;蒋慧丹;刘学端;柏连阳;张思源;袁锐玲 | 申请（专利权）人： | 中南大学;湖南省农业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C09C1/10;C12R1/01 |
| 代理公司： | 长沙轩荣专利代理有限公司 43235 | 代理人： | 黄艺平 |
| 地址： | 410000 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 生物转化 污染 土壤 有机 结合 菌株 应用 | ||
1.一种高效生物转化污染土壤中有机结合态镉的菌株，所述菌株属于Paraburkholderia属菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国、武汉、武汉大学；邮编430072，保藏日为2021年6月1日，保藏编号为：CCTCC NO.M2021653；所述菌株的16srDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种高效生物转化污染土壤中有机结合态镉的菌株筛选方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：
(1)将镉污染土壤加入无菌水中，搅拌静置取上清液；
(2)将所述上清液加入至以腐植酸为唯一能源物质的改良9K分离培养基中培养获得培养菌液；
(3)将所述培养菌液涂布到固体选择培养基平板上，待长出菌落后，挑取单菌落，连续多次划线获得纯菌落；
(4)将所述纯菌落接种至不同镉浓度的固体选择培养基平板上，获得耐镉能力强菌株；
(5)将所述耐镉能力强的菌株重复7-8次转接纯化获得稳定单一的高效生物转化污染土壤有机结合态镉的菌株。
3.根据权利要求2所述的高效生物转化污染土壤有机结合态镉菌株的筛选方法，其特征在于，所述改良9K分离培养基的配方为：
HA 0.3g、MgSO4·7H2O 0.5g、Ca(NO3)2·4H2O 0.01g、K2HPO4 0.5g、(NH4)2SO4 3.0g、KCl0.1g和蒸馏水1000mL。
4.如权利要求1所述的高效生物转化污染土壤有机结合态镉的菌株培养方法，其特征在于，所述培养方法的培养基为：HA 0.3g、MgSO4·7H2O 0.5g、Ca(NO3)2·4H2O 0.01g、K2HPO40.5g、(NH4)2SO4 3.0g、KCl 0.1g和蒸馏水1000mL；
所述培养条件为：菌株的接种浓度为1.0×106个/毫升，初始pH值为5.0，培养温度为30-35℃，摇床转速为180rpm。
5.如权利要求1所述的高效生物转化污染土壤有机结合态镉的菌株的应用，其特征在于，用于镉污染土壤，应用方法为：
将浓度为5.0×107-1.0×108个/mL的菌剂加入至镉污染土壤中，所述镉污染土壤质量：菌剂体积＝(0.1-1.0kg)：1L，搅拌处理0.5-48h。
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