[发明专利]一种中和抗体的生物传感检测方法及检测系统

说明书

本发明涉及光纤生物传感技术领域，公开了一种中和抗体的生物传感检测方法及检测系统。本发明提供中和抗体的生物传感检测方法及检测系统，基于光纤生物层干涉技术，结合有效的信号放大，建立快速、高灵敏性、简便、可定量的全自动光学生物传感检测方法和检测系统，可用于对人血清中的新冠中和抗体的检测和以干血斑取样方法获得的全血样本中的新冠中和抗体等的检测。本发明所提供的中和抗体的生物传感检测方法及检测系统为临床提供了一项具有临床适用价值的体外诊断平台。

技术领域

本发明涉及光纤生物传感技术领域，特别涉及一种中和抗体的生物传感检测方法及检测系统。

背景技术

为防止疫情进一步蔓延，新冠疫苗研发成为全球药物研究领域的热点。在疫苗接种的过程中，体内会产生大量的特异性抗体，包括中和抗体与结合抗体。中和抗体是使病毒失去结合受体的能力的抗体，结合抗体仅指可以结合病毒表面区域的抗体。临床上对新冠中和抗体的监测意义最为重大，它是评价新冠疫苗安全效用的重要指标，同时，对结合抗体进行监测可以帮助回答新冠病毒的感染史，助于流行病学研究。国内外现有针对新冠结合抗体的检测主要是ELISA和试纸条，前者精确但耗时耗力，后者简便快速、但无法提供准确的定量信息。国内外现有针对新冠中和抗体的检测是基于活细胞的病毒中和测试实验，需要严格的生物安全三级实验室的操作环境、操作程序复杂。因此，临床上亟需兼具高灵敏性、简便与快速的自动化生物传感体系，允许在常规实验室对单个或者高通量样本进行快速监测。

生物层干涉技术是一种通过检测干涉光谱的位移变化来检测传感器表面反应的技术。当一束可见光从光谱仪射出后，在光纤传感器末端的光学膜层的两个界面会形成两束反射光谱，并形成一束干涉光谱。光谱的红移(单位：nm)大小与末端特异性结合分子的浓度呈正相关。但是其在低检测浓度下呈现的信号强度非常有限，因此很少用于定量分析中。

在本申请中用到的一些缩略语、英文和关键术语定义如下：

1.新型冠状病毒或COVID-19，简称新冠；

2.BLI:biolayer interferometry,生物层干涉技术；

3.NAbs:Neutralizing antibodies,中和抗体；

4.hACE2:Human Angiotensin-converting enzyme 2,人血管紧张素转化酶2；

5.RBD:receptor binding domain,受体结合区域；

6.DAB:3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride,3,3-二氨基联苯胺四盐酸；

7.HRP:Horseradish Peroxidase,辣根过氧化物酶；

8.r-NAb-RBD:rabbit neutralizing antibody towards receptor bindingdomain，兔源性抗RBD中和性单克隆抗体。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中和抗体的生物传感检测方法及检测系统，通过对生物层干涉技术有效的信号放大，获得针对新冠中和抗体快速监测的自动化生物传感体系，助力新冠疫苗的研发与效价评估。

为解决上述技术问题，本发明的第一方面提供一种中和抗体的生物传感检测方法，包括：

(1)制备待测样本与RBD-HRP的混合液：获得待测者的血清或干血斑全血，作为待测样本；将待测样本稀释后与RBD-HRP偶联物混合，得到待测样本与RBD-HRP的混合液；

(2)制备光纤探针：将生物素化的hACE2作为抗原，固定至链霉亲和素芯片表面，得到光纤探针；