[发明专利]一种用于监测液相质谱分析过程中样品残留程度的方法

说明书

本发明公开了一种用于监测液相质谱分析过程中样品残留程度的方法，包括以下步骤：1)设置至少两组外源肽段参考品，每组外源肽段参考品至少包含三条不同极性的肽段，组间肽段均不相同，但是每组中三条肽段的极性分布与其他组中三条肽段的极性分布相同；2)将外源肽段参考品组整体交替排列，即按照参考品组1,2,3…n,1,2,3…n,1,2,3…n…排列，样品按进样顺序，即按照样品1,2,3…m排列，两者依此分别成对混合；3)进样检测，提取处理数据，根据每组中相同极性的外源肽段参考品的残留率，评价针对该极性的分离柱效及样品残留程度。该方法用以评估液相质谱分析过程中，分离柱效及连续进样造成的样品残留程度。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地，涉及一种用于监测液相质谱分析过程中样品残留程度的方法。

背景技术

随着大数据时代的到来，大样本队列正在逐步增多。限于仪器性能、方法、数量等的局限，提高液相质谱的有效时间利用率就变得极为必要。

目前，大多数液相质谱方法都需要有单独的清洗色谱柱的时间，并在样品间插入标品的检测，用于评估上一个样本的残留，避免对后续样本造成检测污染，这样会减少液相色谱有效的检测时间。当优化方法达到每一次检测方法最后跟随的短清洗梯度可以基本将所有残留清洗干净时，即可以将单独设置的清洗色谱时间取消。但随之而来的问题是，随着样本数目的积累，可能会出现色谱柱效的降低或实验环境的波动等问题，但却无法有效便捷的评估连续样本残留的积累对样品分析造成的影响，也无法确定哪些样本受影响过大而造成数据已经较大偏离真实情况而无法使用。

发明内容

发明目的：为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于监测液相质谱分析过程中样品残留程度的方法。

技术方案：为达到上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于监测液相质谱分析过程中样品残留程度的方法，包括以下步骤：

1)设置至少两组外源肽段参考品，每组外源肽段参考品至少包含三条不同极性的肽段，组间肽段均不相同，但是每组中三条肽段的极性分布与其他组中三条肽段的极性分布相同；

2)将外源肽段参考品组整体交替排列，即按照参考品组1,2,3…n,1,2,3…n,1,2,3…n…排列，样品按进样顺序，即按照样品1,2,3…m排列，两者依此分别成对混合；

3)进样检测，提取处理数据，根据每组中相同极性的外源肽段参考品的残留率，计算公式为：残留百分率＝上次样品中肽段参考品的肽段强度/当次样品中对应肽段参考品的肽段强度，评价针对该极性的分离柱效及样品残留程度。

优选的，步骤1)中，所述三条不同极性的肽段，其极性分布为：分别可以被5-30％，30-60％，60-95％乙腈水溶液从液相色谱柱上洗脱。

优选的，步骤1)中，所述组间肽段均不相同，包括序列、同位素标记、修饰等的不同，即能够达到在质谱中区分不同肽段的目的即可。

优选的，步骤2)中，所述样品数量大于等于参考品组数，参考品组数量大于等于两组小于样品数，所述参考品组数量至少两组，且不多于样品数量，即m大于等于n。

优选的，步骤2)中，所述外源肽段参考品加入前进行准确定量。

优选的，步骤3)中，所述提取处理数据，可以使用软件对肽段参考品的肽段进行定性定量数据提取，可使用部分先进质谱检测软件自带的实时鉴定方法，或在获得全数据后进行定性定量数据提取。

优选的，步骤3)中，所述提取处理数据，使用蛋白质组分析软件Spectronaut，将所有定性定量肽段数据进行导出，对导出数据进行手动或编程软件搜索并确定相应差异倍数。

作为优选方案，当外源肽段参考品设置两组时，具体的方法如下：