[发明专利]一种降血糖药物的筛选方法

说明书

本发明提供一种降血糖药物的筛选方法，通过对模型细胞代谢物的分析，确定与降血糖相关的生物标志物及其含量变化，从而建立降血糖药物的筛选模型，并用于降血糖相关药物的筛选，从而为药物的筛选提供一种新的模式。本发明方法通过系统生物学策略，通过一组或一群生物靶标综合评价抗氧化活性，相对于单一指标而言，更加全面、准确。细胞代谢组学是以生物体内源性物质为研究对象，使得复杂的生命体系与抗氧化活性有机的关联，与化学方法比较，更具有代表性。

技术领域

本发明属于药物筛选方法的建立和应用技术领域，具体涉及一种降血糖药物 的筛选方法。

背景技术

糖尿病是一种由个体遗传因素和环境因素(肥胖率上升、高能量饮食和低运 动水平等)相互作用引起的糖代谢紊乱疾病，最终导致胰腺β细胞功能障碍。截 至2019年，全世界糖尿病患者增加到4.63亿，预计到2045年将有7亿人患糖 尿病。在中国，近90％的糖尿病患者是2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus， T2DM)，其膳食结构受到限制，生活质量下降，医疗负担繁重。

目前降血糖药物的评价方法主要包含有化学方法、细胞学方法和动物模型 法。但由于胰岛细胞慢性高糖损伤作用机制复杂，动物模型法实验种间差异 大、周期较长、重复性较差，传统的化学方法如α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶或细 胞学方法检测指标均比较单一，不能对活性物质活性强弱及作用机制进行全面 准确评价。因此亟需建立一种新的降糖活性评价方法。细胞代谢组学以细胞代 谢物为研究对象，通过代谢组数据库和精密仪器对胞内代谢产物进行定性和定 量分析，寻找条件干预后的差异代谢物，并通过分析活性物质干预后细胞代谢 物多指标的变化可以对活性强弱进行全面分析及评价。

发明内容

本发明的目的是提供一种降血糖药物的筛选方法，通过对模型细胞代谢物 的分析，确定与降血糖相关的生物标志物及其含量变化，从而建立降血糖药物 的筛选模型，并用于降血糖相关药物的筛选，从而为药物的筛选提供一种新的 模式。

本发明首先提供一种与降血糖药物的筛选相关的生物标志物组合，所述的 组合为丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、还原谷胱甘肽、氧化谷胱甘肽、苏氨酸、半 胱氨酸、牛磺酸、异亮氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、马尿酸、肌醇、 硝基酪氨酸、胞嘧啶核苷、马来酸、延胡索酸、琥珀酸、色氨酸、谷氨酰胺、蛋 氨酸、组氨酸。

本发明还提供一种通过上述的生物标志物的含量来筛选降血糖药物的模 型，所述的模型如下：

Y＝-7*10^-4X²+0.0474X+0.1645(0X40),R²＝0.9522

其中X代表样品的预测值，Y代表降血糖活性值，Y值在0-1之间，Y值越 接近于1，说明降血糖效果越好；Y值越接近0，说明降血糖效果越差。

其中X代表样品的预测值，其获得方法为：

1)用待筛选的药物处理高血糖细胞系，并测定上述的生物标志物组合中各 代谢物在药物处理组和对照组的含量；

2)对获取的对照组和模型组各代谢物含量信息进行预处理，使对照组和模 型组的各代谢物的峰对齐；

所述的预处理，是进行归一化、正交信号校正OSC处理；

3)得到代谢物导入SIMCA软件，进行PCA分析，根据对照组和模型组的 分组趋势确定R2值和Q2值；然后进行正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA) 对获取的数据信息进行判别分析，得到分组模型后，将样品处理组得到代谢组导 入SIMCA软件，得到预测值，

本发明再一个方面提供一种用于降血糖药物的筛选方法，是使用上述的筛选 降血糖药物的模型来筛选具有效果的降血糖药物组分；

所述的方法，包括如下的步骤：