[发明专利]一种熊去氧胆酸的纯化方法

说明书

本发明公开了一种熊去氧胆酸的纯化方法，包括以下步骤：步骤A为熊去氧胆酸的4‑二甲基吡啶铵盐的制备；步骤B为熊去氧胆酸的4‑二甲基吡啶铵盐的水解。本发明操作简便，使用的溶剂、试剂价廉易得，适合工业化生产，得到的熊去氧胆酸纯度高。

技术领域

本发明涉及医药中间体分离领域，具体地涉及一种熊去氧胆酸的纯化方法。

背景技术

熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid，UDCA)(如式1所示)，化学名称3α,7β-二羟基-5β-胆甾烷-24-酸(3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid)，CAS号128-13-2，分子式C₂₄H₄₀O₄，分子量392.56，白色粉末，无臭，味苦，熔点为203-204℃。熊去氧胆酸是名贵中药熊胆所含的主要成分，是美国FDA批准的原发性胆汁性肝硬化(PBC)的一线治疗药物，在临床上还可以有效治疗胆结石类疾病和慢性肝病，具有广阔的市场前景。目前，制备熊去氧胆酸主要有动物胆汁提取和人工合成两种方法，但动物胆汁提取来源有限，难以满足临床需要，因此主要依赖人工合成。

目前，由于鹅去氧胆酸廉价易得，工业上主要以鹅去氧胆酸为原料，通过化学氧化、还原反应(BioorganicMedicinal Chemistry,2016,24:3986-3993.等)或酶法氧化、还原反应(Bioprocess and Biosystems Engineering,2019,42(9):1537-1545.等)来制备熊去氧胆酸。在此反应产物中，除产品熊去氧胆酸，还有中间体7-酮石胆酸(7K-LCA，3α-羟基-7-羰基-5β-胆烷酸)以及鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholic acid，CDCA，3α,7α-二羟基-5β-胆烷-24-酸)等副产物，纯化较为困难。

目前工业上主要采用乙酸乙酯等溶剂多次洗涤纯化，选择性地从含有熊去氧胆酸的混合物中溶解除去鹅去氧胆酸等相关杂质，实际生产中需要用30倍以上的乙酸乙酯才能将鹅去氧胆酸等杂质溶解除去，溶剂消耗大、成本高，纯化效果不理想。中国专利文献(CN106928306A)公开了通过三乙胺处理粗品熊去氧胆酸，经过三步精制步骤，得到熊去氧胆酸精品，产品回收率82.8％-85.3％，操作相对较复杂，收率也不理想。

发明内容

本发明的目的是针对以上存在的问题与不足，提供一种操作简便、使用的溶剂、试剂价廉易得、得到的熊去氧胆酸纯度高、适宜工业化生产的纯化方法。

为了实现上述目的，本发明提供了一种纯化熊去氧胆酸的方法，其特点是，包括以下步骤：

A.熊去氧胆酸的4-二甲基吡啶铵盐的制备

将熊去氧胆酸粗品溶于第一溶剂和第二溶剂的混合溶液中，搅拌升温至55-70℃，加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)，升温回流反应1-4h，缓慢降温，在0-5℃条件下搅拌0.5-4h，抽滤，用第一溶剂洗涤滤饼，干燥，得到熊去氧胆酸的4-二甲基吡啶铵盐。

B.熊去氧胆酸的4-二甲基吡啶铵盐的水解

将步骤A中得到的熊去氧胆酸的4-二甲基吡啶铵盐悬浮在水中，加入碱，调节pH调节至12.0-12.5，在20-25℃条件下搅拌1-4h；滴加酸调节pH至2.0-2.5，在20-25℃搅拌1-4h；过滤，收集滤饼并用水洗涤，干燥，得到熊去氧胆酸纯品。

所述反应过程如路线(I)所示：

路线(I)

步骤A中，

所述熊去氧胆酸粗品的纯度为70％-90％；优选地，为90％。

所述第一溶剂为丙酮。