[发明专利]一种获知贵金属增强荧光探针最佳精确距离的方法

权利要求书

1.一种获知贵金属增强荧光探针最佳精确距离的方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤(1)、通过分子结合力的方法制备一定壳层厚度的二氧化硅@金纳米颗粒；

在纳米金粒子溶液中加入表面活性剂，调节pH至10～11，混合均匀；然后在缓慢搅拌下继续加入正硅酸乙酯-乙醇溶液，构建在纳米金粒子周围形成均匀的3～25nm二氧化硅壳层厚度的二氧化硅@金纳米胶体溶液；

步骤(2)、通过分子结合力的方法，在二氧化硅壳层表面修饰氨丙基三乙氧基硅烷

将3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)添加到上述二氧化硅@金纳米胶体溶液中，并在室温下反应2～3h，接着在20～50℃反应1～3h，离心收集，洗涤得到氨丙基三乙氧基硅烷修饰的二氧化硅@纳米金胶体溶液；

步骤(3)、将不同密度Ag₂S量子点包覆在氨丙基三乙氧基硅烷修饰的二氧化硅@纳米金胶体溶液中二氧化硅表面，采用表面等离子体共振技术，使得量子点与纳米金之间的等离子体共振耦合，以达到荧光强度最大化，获知量子点与纳米金之间的最佳初步距离L1，以及量子点包覆在二氧化硅表面的最优密度；

步骤(4)、不同链长DNA耦合金纳米颗粒和Ag₂S量子点

4-1将金纳米颗粒与羟基标记的DNA1(SH-DNA)混合孵育24-30h后，加入SDS、NaCl、PB缓冲溶液，在30℃下再温育24-30h，得到DNA1-Au NP；

4-2在Ag₂S QDs生长溶液中加入硫代磷酸化的DNA2，在90℃下反应12h，获得DNA2-Ag₂SQDs；

4-3在DNA1-Au NP、DNA2-Ag₂S QDs、PB缓冲液中添加不同链长的DNA3，在37℃下孵育2h；其中DNA2-Ag2S QDs以步骤3获知的量子点最优密度与DNA1-Au NP进行结合；

4-4采用表面等离子体共振技术，根据荧光强度进一步获知量子点与纳米金之间的最佳精确距离；

所述的DNA1与DNA3满足碱基互补配对原则；DNA2与DNA3满足碱基互补配对原则；

所述的DNA3链长L2满足L1-a＜L2＜L1+a，a为根据经验设定的参数。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述金纳米颗粒的形状为棒状或球状。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述金纳米颗粒采用纳米金棒，纳米金棒的长度为58～64nm，直径为18～23nm，最大吸收波长为770～790nm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述表面活性剂采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述所述正硅酸乙酯-乙醇溶液为正硅酸乙酯(TEOS)与乙醇的混合液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述所述3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)与二氧化硅@金纳米胶体溶液的体积比为1:1000。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于二氧化硅壳层表面修饰氨丙基三乙氧基硅烷的温度为30℃，时间为24h。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于量子点包覆在二氧化硅表面的温度为20～25℃,时间为4～5h。

9.一种前列腺癌快速检测试剂盒，包括近红外Ag₂S量子点荧光探针；该近红外Ag₂S量子点荧光探针，包括DNA耦合金纳米颗粒和DNA耦合Ag₂S量子点。

10.根据权利要求1所述的一种前列腺癌快速检测试剂盒，其特征在于所述的前列腺癌标志物为PCA3。