[发明专利]一种倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置及其使用方法和应用

说明书

本发明提供了一种倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置及其使用方法和应用，所述装置包括池体(1)，所述池体(1)包括池壁(2)、池底(3)和池盖(5)，所述池壁(2)上设置进气口(11)、出气口(12)、进水口(13)和出水口(14)，所述池底(3)上设有开口(7)，所述池盖(5)上设有染液进出口(9)。本发明还提供了所述倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置的使用方法。本发明所述装置结构合理，设计科学，实现了细胞的原位培养、染色与观察，提高了工作效率。

技术领域

本发明属于细胞培养技术领域，尤其涉及一种倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置及其使用方法和应用。

背景技术

在细胞培养过程中，对活细胞进行动态观测在生命科学研究领域及医学研究领域中具有重要意义，对细胞繁殖转移、细胞吞噬及细胞间的相互作用等进行研究是生命科学的重要基础。

目前，传统的细胞培养在培养箱中完成，尽管传统细胞培养箱的箱内环境控制系统能够尽量避免培养过程中打开箱门造成腔内温度的大幅波动，但也无法杜绝细胞从培养箱中取出，移至室温环境产生的温度变化及细胞污染的可能，也给操作人员增加了转移操作过程的失误风险。细胞染色技术用于区分不同种类、不同形态、不同状态的细胞及细胞间的相互作用，通常是将待检测样本取出，滴入具有不同染色效果的染色液和缓冲液，混合均匀完成染色后，再洗掉影响观察的染色液及缓冲液，完成整个染色过程后转移到显微镜上观察。

现有技术中的培养装置难以满足活细胞的原位培养、原位染色及原位观察的需求。CN209797991U公开了一种原位观测细胞培养箱，包括主机与细胞培养室；所述的主机包括温控装置、气体控制装置和液体控制装置，以及CO₂进气口、第一进气口、第一出气口和注水口；所述的气体控制装置的入口与CO₂进气口和第一进气口相连接，出口与第一出气口相连接；所述液体控制装置的入口与注水口相连接，出口与第一出气口相连接；所述的细胞培养室包括盒体和上盖板，盒体内放置微流控芯片；所述盒体上设有偶数个液体管路接口；所述上盖板上设有上观察窗；所述盒体底部设有下观察窗，所述下观察窗与所述上观察窗相对设置；所述盒体上设有第二进气口和第二出气口，所述第二进气口与第一出气口进行连通，所述第二出气口与第一进气口进行连通。该装置实现了细胞的原位培养与观察，但是无法直接对装置内的细胞进行染色，操作较为不便。

因此，如何提供一种装置，可以实现细胞的原位培养、染色和观察，方便研究人员的操作，减少外界环境对细胞的影响，已成为亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置及其使用方法和应用，杜绝了从培养箱中转移细胞到室温环境中产生的影响，也避免了操作人员转移操作中可能出现的失误，同时满足了细胞的原位培养、染色和观察，便于实时观察细胞的培养、吞噬及相互作用等情况。

为达此目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种倒置显微镜用细胞的原位培养、染色和观察的装置，所述装置包括池体1，所述池体1包括池壁2、池底3和池盖5，所述池壁2上设置进气口11、出气口12、进水口13和出水口14，所述池底3上设有开口7，所述池盖5上设有染液进出口9。

本发明中，通过设置进气口11、出气口12、进水口13和出水口14，实现了装置内气体组成及温度的恒定，避免因周围环境条件骤变而对细胞的生理状态造成影响；通过设置可以放置培养皿的开口7，实现了细胞的原位培养与观察，配合染液进出口9与注射器的使用，实现了细胞的原位染色与观察，方便对细胞进行实时观测及定位，实验结果更加准确，使用也更加方便。

优选地，所述装置中还设有池隔板4，所述池隔板4与所述池壁2、池底3围合的闭合空间中装有恒温循环水。

优选地，所述池盖5上还设有温度传感器插入口8。