[发明专利]一种马兜铃酸I的定量检测方法与限量方法

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体公开了一种马兜铃酸I的定量检测方法与限量方法，可用于含有或疑似含有马兜铃酸I的物质或产品的质量控制与马兜铃酸的限量。本发明采用液相色谱串联质谱检测的方法明确了适用的色谱条件与质谱条件，并特别针对清肺排毒颗粒中马兜铃酸I的定量检测方法与限量方法进行了细致的方法学探究与优化，为清肺排毒颗粒的质量控制提供了良好的科学依据和解决方案。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种马兜铃酸I的定量检测方法与限量方法。

背景技术

清肺排毒汤由麻杏石甘汤、小柴胡汤、五苓散、射干麻黄汤4个经典方组成，均源自汉代张仲景所著的《伤寒杂病论》，组方合理，性味平和，可宣肺平喘、解毒化湿，用于外感寒湿，内有郁热，脾胃失调所致寒湿闭肺扰脾证，可减轻寒湿疫患者主要症状，对普通型、轻型和重型均有明显疗效。

清肺排毒颗粒是一种基于“清肺排毒汤”复方研制而成的颗粒剂，该颗粒剂既保持了汤剂吸收快、作用迅速的优点，又克服了汤剂临用时煎煮不方便、服用量大、易霉变等缺点。

然而，以上中药复方中含有细辛，根据文献报道，细辛中含有马兜铃酸类化合物，而马兜铃酸类化合物是马兜铃科马兜铃属植物特有的一类硝基菲类化合物。近几十年以来，临床上由于长期服用含有马兜铃酸类化合物的药物，不断出现含马兜铃酸类成分的药品引起肝肾损伤的病例，自2000年5月起，FDA禁止了含有马兜铃酸类成分的中成药，包括马兜铃、广防己、天仙藤等相关草药的进口和销售。在马兜铃酸类化合物中，马兜铃酸I(aristolochic acid I，AAI)为其主要毒性成分。《中国药典》2020年版中规定，细辛每日的用量范围为1～3g，且每克细辛中马兜铃酸I(aristolochic acid I，AAI)的含量不得超过0.001％。

因此，在加强“清肺排毒汤”复方应用推广的同时，也需对不同剂型药物中的马兜铃酸I含量进行严格的检测与控制。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是建立一种适用于清肺排毒颗粒中马兜铃酸I的定量检测方法与限量方法。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供一种马兜铃酸I的定量检测方法，采用液相色谱-质谱联用仪对待测样品中的马兜铃酸I进行检测；

色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以乙腈为流动相A，0.1％甲酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱过程为：0-7min内，流动相A和流动相B的体积比从40:60匀速渐变至 60:40；7-8.5min内，流动相A和流动相B的体积比从60:40匀速渐变至 95:5；8.5-10min内，流动相A和流动相B的体积比为95:5；10-10.1min 内，流动相A和流动相B的体积比从95:5匀速渐变至40:60；10.1-13min 内，流动相A和流动相B的体积比为40:60；

质谱条件包括：采用MRM模式,在正离子下进行扫描，对质荷比 (m/z)359.0→298.0和359.0→296.0离子对进行检测。

进一步地，色谱条件还包括：进样体积为2μL，柱温为35℃，流速为0.3mL/min。

进一步地，质谱条件还包括：电喷雾离子源，正离子毛细管电压4 kV，负离子毛细管电压3.5kV干燥气温度300℃，干燥气流速5L/min，鞘气温度250℃，鞘气流速11L/min，雾化器压力45psi。

第二方面，本发明提供一种马兜铃酸I的限量方法，包括如下步骤：

(1)以马兜铃酸I作为对照品，配制浓度为目标限量浓度的对照品溶液；

(2)利用待测样品配制供试品溶液；

所述待测样品为含有或疑似含有马兜铃酸I的任意物质或产品；