[发明专利]一种生物组织中纳米颗粒的提取方法

说明书

本发明提供了一种生物组织中纳米颗粒的提取方法。所述提取方法包括以下步骤：(1)将含纳米颗粒的生物组织和研磨液混合研磨，制成组织匀浆；(2)将步骤(1)所述组织匀浆用四甲基氢氧化铵溶液溶解，提取得到纳米颗粒。本发明所提供的提取方法，通过较低浓度四甲基氢氧化铵溶液溶解生物组织匀浆，在保证纳米颗粒完整颗粒性的基础上，避免了纳米颗粒团聚，缩短了提取时间、提取率高、操作简单、成本低。

技术领域

本发明属于生物化学的技术领域，涉及一种生物组织中纳米颗粒的提取方法。

背景技术

近年来，随着纳米技术的发展，纳米材料由于具有独特的性质，广泛应用于化妆品、纺织品、食品、生物医药等领域，这些产品在使用中会与人体皮肤、汗液、血液等接触，纳米材料的生物安全性倍受关注。研究表明纳米颗粒的剂量、尺寸、形状、化学组成、分散状态、表面特征如表面电荷、化学物修饰等是影响细胞行为和功能的主要因素。定量检测纳米颗粒在生物组织中的分布，为生物安全性评价研究提供重要可靠的数据。

对组织中的纳米材料进行定量包括提取组织中的纳米材料及使用仪器对纳米材料进行定量检测。从组织中提取纳米材料是为了得到与细胞、动物组织等接触的纳米材料相同的颗粒形式的纳米颗粒，以便对进入组织中纳米颗粒形貌、尺寸、数量等进行表征。许多用于组织消解的化学试剂，如硝酸、盐酸和氢氟酸，会使纳米材料溶解或破坏其结构，这种酸消解组织方法样品中测得的金属离子量不一定是进入生物组织的纳米材料量，而可能是这些纳米材料的离子对应物以及组织中的离子。为了提取组织中的纳米材料，可以采用化学或酶解的方法。

CN101977509A揭示了与20～80％乳杆菌属生物组分结合的银纳米颗粒，所述银纳米颗粒的平均粒度与比表面积(BET)的比值为0.015～0.15纳米/米²/克；生产银纳米颗粒的方法，包括以下步骤：在氨和碱金属氢氧化物存在下，用包含至少4mM银盐的水溶液温育乳杆菌属的细菌，直到形成含Ag⁰银纳米颗粒的细菌的生物质，和任选地利用浓碱金属氢氧化物或浓无机酸或酶从所述生物质提取所述Ag⁰银纳米颗粒。

目前报道的采用酶或碱溶解组织提取金或银等纳米颗粒的文献中，多存在提取时间长、提取效率低或纳米颗粒团聚等问题。

因此，如何快速、高效地从生物组织中提取纳米颗粒，是亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生物组织中纳米颗粒的提取方法。本发明所提供的提取方法，通过较低浓度四甲基氢氧化铵溶液溶解生物组织匀浆，在保证纳米颗粒完整颗粒性的基础上，避免了高浓度四甲基氢氧化铵溶液可能引起的纳米颗粒团聚，使得纳米颗粒的提取率较高，还缩短了提取时间，且操作简单、成本低。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了一种生物组织中纳米颗粒的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：

(1)将含纳米颗粒的生物组织和研磨液混合研磨，制成组织匀浆；

(2)将步骤(1)所述组织匀浆用四甲基氢氧化铵溶液溶解，提取得到纳米颗粒。

本发明中，经过四甲基氢氧化铵溶液溶解后，得到纳米颗粒的悬浮液，即可得到纳米颗粒，同时也可以对其进行表征或者应用。

本发明中，先用研磨液和生物组织混合研磨，得到组织匀浆，更有利于生物组织的溶解，在此基础上，就可用较低浓度的四甲基氢氧化铵溶液溶解掉生物组织，避免了高浓度四甲基氢氧化铵(TMAH)溶液可能引起的纳米颗粒团聚，提升了提取率、缩短了提取时间、操作简单、成本低。

本发明所提供的生物组织，是指广泛意义上的动物组织，例如可以选自鸡肉组织、鱼类组织、或实验鼠组织等。

本发明中，不对纳米颗粒做限定，例如可以选自银纳米颗粒或金纳米颗粒等。