[发明专利]一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法

权利要求书

1.一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，该方法由经液体碳胶和多壁碳纳米管修饰的针状电极构成的三电极体系对接种PstDC3000后番茄侧茎中水杨酸进行原位实时检测；其特征在于，该方法具体包括以下步骤：

S1：通过液体碳胶和多壁碳纳米管对硬质铂丝进行修饰，并优化电极的工作面积，构建出纳米材料修饰的针状工作电极；

S2：构建经步骤S1纳米材料修饰的针状工作电极为工作电极，铂丝电极为对电极，和Ag/AgCl银丝电极为参比电极的三电极集成模式针状电极检测体系；

S3：将步骤S2构建的针状电极检测体系与电化学工作站相连接，，检测不同浓度SA标准品溶液，获得检测SA标准曲线；

S4：将经过步骤S3检测的针状电极检测体系插入番茄侧茎内，并与电化学工作站相连接，对番茄侧茎中SA进行原位实时检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S1中构建出纳米材料修饰的针状工作电极的具体步骤为：将直径0.1 mm的硬质铂丝浸入乙醇和蒸馏水中，超声处理10min，晾干；将晾干的铂丝插入直径0.3mm的毛细管中，一端露出2mm，用3M超能胶将电极两端固定；用铜导电胶带包裹铂丝的另一端；将电极露出2mm的一端依次浸入体积分数为50%的液体碳胶和体积分数为0.5%的多壁碳溶液10min，晾干即可使用。

3.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S2中对电极的具体制备方法包括如下步骤：将直径0.1 mm的硬质铂丝浸入乙醇和蒸馏水中，超声处理10min，晾干；将晾干的铂丝插入直径0.3mm的毛细管中，一端露出2mm，用3M超能胶将电极两端固定；用铜导电胶带包裹铂丝的另一端，即可使用。

4.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S2中参比电极制备的具体制备方法包括如下步骤：将直径0.1 mm的银丝浸入乙醇和蒸馏水中，超声处理10min，晾干；将晾干的银丝放入84消毒液中直至完全变黑，使其成为Ag/AgCl参比电极；将变黑的Ag/AgCl参比电极插入直径0.3mm的毛细管中，一端露出2mm，用3M超能胶将电极两端固定；用铜导电胶带包裹电极的另一端，即可使用。

5.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S3中不同浓度SA标准品溶液的配制过程具体包括如下步骤：首先配制10mM的SA溶液，再使用缓冲溶液进行稀释，制备SA溶液的浓度依次为0.1、1、3、5、10、30μM。

6.根据权利要求5所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液是0.2M，pH 7.5的PBS溶液，其配制方法为：依次配制0.2mol/L的K₂HPO₄溶液和KH₂PO₄溶液，将K₂HPO₄溶液KH₂PO₄溶液进行混合，调节pH至7.5。

7.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S3中的标准曲线，其检测关系函数为Y＝0.836X+1.904；Y代表电流，单位为μA；X代表SA的浓度，单位为μmol/L。

8.根据权利要求1所述的一种基于针状电极的植物水杨酸原位实时检测方法，其特征在于，所述步骤S4中番茄植株的处理方法具体包括如下步骤：制备番茄细菌性叶斑病PstDC3000浸染液，将其喷洒在培养好的番茄植株上为实验组，以直接喷洒相同体积的MgCl₂缓冲液到番茄植株为对照组，实验组和对照组各为3~4株番茄，分别放入两个不同的透明收纳盒中保湿培养；将培养好的番茄植株用直径为0.4mm的不锈钢针在其侧茎上取3个点。