[发明专利]一种西瓜组培快繁方法

权利要求书

1.一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：包括选取外植体、离体后处理、脱分化、分化培养、壮苗培养、嫁接、炼苗步骤；所述的选取外植体：外植体为茎尖，长度为1-1.5cm；所述分化培养：培养时间为20-24天；所述炼苗：采将组培嫁接苗移栽于培养基质中，覆膜，炼苗20天，前十天炼苗：光照强度为2800-2900Lx，光照时间为12-14h，控制温度：白天为27-28℃，夜间为17-20℃，湿度为67-70％；后十天炼苗：光照强度为3000-3100Lx，光照时间为10-11h，控制温度：白天为31-32℃，夜间为12-15℃，湿度为60-63％。

2.根据权利要求1所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述炼苗步骤的培养基质由以下方法制备：由椰壳粉、甲壳素、木鱼石粉、河沙、鸡粪按照20-30：5-8：10-14：9-13：3-4的质量比混合，喷洒去离子水控制含水量为34-36％，得到培养基生料；将培养基生料与内切纤维素酶、植酸酶、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌按照150-160:1-2:1.5-2.2：6-8:3-4进行混合得到预混料；将预混料发酵得到培养基质。

3.根据权利要求2所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述内切纤维素酶的酶活为15-18U/g；所述植酸酶的酶活为400-450U/g；所述枯草芽孢杆菌的活菌数为8.2×10⁹-8.5×10⁹cfu/g，所述胶冻样芽孢杆菌的活菌数为2.5×10⁹-3×10⁹cfu/g。

4.根据权利要求1所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述嫁接：组培苗为接穗；采用的砧木为二叶一心的葫芦实生苗；嫁接后第二至四天，每天喷洒促生液，喷洒时间为上午9:00-10:00。

5.根据权利要求4所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述促生液为由海藻酸0.4-0.5mg/L、壳聚糖0.25-0.31mg/L、木糖醇0.12-0.15mg/L、油菜素内酯0.02-0.04mg/L、茉莉酸0.02-0.03mg/L配制而成的水溶液。

6.根据权利要求1所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述离体后处理：将外植体转移至组培实验室中进行离体后处理；所述离体后处理包括消毒处理和浸泡处理；所述浸泡处理：将硫酸镁、磷酸二氢钾、氯化钙、无菌水按照2：0.5：1：200的质量比混合，得到混合溶液；将消毒处理后的外植体置于上述混合溶液中，在20-25℃条件下浸泡2-2.5min。

7.根据权利要求1所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述脱分化：脱分化培养液的制备方法如下：按照以下配方配置成水溶液：KNO₃ 5.4g/L、硫酸铵9.3g/L、磷酸二氢钾85mg/L、MgSO₄·7H₂O 139mg/L、硫酸锌20mg/L、KI 0.75mg/L、硼酸5.2mg/L、MnSO₄·H₂O7.3mg/L、钼酸钠12.5mg/L、Na2MnO4·2H2O 9.25mg/L、CuSO4·5H2O 3.1mg/L、CoCl₂·6H₂O0.58mg/L、FeSO₄·7H₂O 7.2mg/L、氯化钠0.25mg/L、叶酸0.15mg/L、生物素0.83mg/L、胆碱0.01mg/L、吲哚乙酸0.06mg/L、6-BA 0.06mg/L。

8.根据权利要求1所述的一种西瓜组培快繁方法，其特征在于：所述分化培养：将愈伤组织转接到分化培养基上进行培养20-24天，包括一阶段培养和二阶段培养；一阶段培养：培养时间为10-12天，培养温度为26℃，光照强度为2400-2600LX，光照时长为9h/天；二阶段培养：培养时间为10-12天，培养温度为26℃，光照强度为2200-2300LX，光照时长为11h/天。