[发明专利]一种人卵母细胞体外成熟液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，配方包括：以无机盐溶液为基础液，添加褪黑素5-15μM/L和亚硒酸盐3-10mg/L；所述无机盐溶液包括无机盐、能量物质，氨基酸，维生素，激素和生长因子。

2.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，所述无机盐包括氯化钠90.5～110.5mM/L、氯化钾3.52～5.90mM/L、二水氯化钙0.89～2.10mM/L、磷酸二氢钾0.05～1.5mM/L、七水硫酸镁0.18～2.20mM/L、碳酸氢钠20～28mM/L、抑菌成份硫酸庆大霉素0.01～0.05g/L和人血白蛋白5～10g/L。

3.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，所述能量物质包括丙酮酸钠0.05～0.10mM/L、L-乳酸钠2.50～22.00mM/L和葡萄糖0.50～5.55mM/L。

4.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，所述氨基酸包括必需氨基酸1～2％(v/v)和非必需氨基酸0.45～1％(v/v)。

5.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，所述维生素含量0.45～1％(v/v)。

6.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，所述激素和生长因子包括重组胰岛素样生长因子(rIGF-1)0.01～1mg/mL，重组表皮细胞生长因子(rEGF)0.01～1mg/mL，重组促卵泡激素(rFSH)0.05～10IU/mL以及重组人绒毛膜促性腺激素(rhCG)0.05～10IU/mL。

7.根据权利要求1所述的人卵母细胞体外成熟液，其特征在于，还包括酚红0.01g/L。

8.一种制备如权利要求1-7任意一项所述的人卵母细胞体外成熟液的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、按配方称量所有固体成分并分开放置；

b、按先固体后液体，将除激素，生长因子和人血清白蛋白外的所有成分加入并溶解于超纯水中；

c、向步骤b获得的溶液加入激素，生长因子和人血清白蛋白并溶解得基础液；

d、测量并调节上述基础液pH值为7.3±0.1，渗透压为260～290mOsm/kg；

f、将基础液经0.22μm过滤器过滤并分装、封口，得到人卵母细胞体外成熟液，并在2-8℃内保存。

9.一种由权利要求8所述的方法配制而成的人卵母细胞体外成熟液。

10.一种如权利要求8所述的方法配制而成的人卵母细胞体外成熟液在人卵母细胞体外成熟培养过程中的应用。