[发明专利]一种检测抗Prelamin A/C-IgG抗体的试剂盒

说明书

本发明提供一种检测抗Prelamin A/C‑IgG抗体的试剂盒，由抗原蛋白Prelamin A/C、固相载体、标准品、阳性质控品、阴性质控品、标记抗体、底物显色液、抗体和抗原稀释液、样品稀释缓冲液、洗涤液、终止液等组成。本发明利用抗Prelamin A/C‑IgG抗体对应的靶抗原Prelamin A/C，以人抗标签肽的IgG作为定量检测的标准品，对血清中形成的抗原抗体复合物进行抗Prelamin A/C‑IgG抗体检测。本发明首次提出以抗Prelamin A/C‑IgG抗体检测作为免疫性肾病综合症的生物标志物。本发明可用于该自身抗体的检测，为自身免疫性肾病综合征的研究和临床诊疗提供了支持。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种检测抗Prelamin A/C-IgG抗体的试剂盒。本发明首次为免疫性肾病综合征提供了一种快速简便且高灵敏地定性或定量分析血清中抗Prelamin A/C-IgG水平的检测试剂盒。

背景技术

免疫性肾病综合征的诊断和治疗是生物医学科学中的一项持续的挑战。肾病综合征是一类因肾小球滤过膜的通透性增加，导致血浆蛋白的滤出增多，从而引发大量的蛋白尿的一系列特征性的病理变化的临床综合症。在很大程度上所表现出的许多症状可以由多样的原因引发(包括先天遗传原因、肾功能损害与功能不全、泌尿生殖道的感染与疾病、药物滥用、食欲不振及营养不良、糖尿病、高血压、感染、损伤、免疫的缺陷和癌症)。

肾病综合征的早期诊断与预测尤为重要。原发性肾病综合征的年发病率因种族和国籍而异，大约在1.15～16.9/10,0000。微小病变性肾病综合征是最为常见的病理类型，这类病人绝大多数对激素治疗敏感，但是10％～20％左右的患儿会出现激素耐药，此类患儿在诊断后的5年内进展为终末期肾病的概率为8％～35％，在诊断后的15年内进展为终末期肾病的概率为24％～66％。

Ali等学者观察发现难治性微小病变的病人的肾脏被移植到受者体内后，肾脏功能转为正常并未出现蛋白尿，由此发生蛋白尿的可能主要是供者的内环境出现了某些方面的问题。除部分因基因缺陷而发病的患儿，大部分原发性肾病综合征的患儿在接受了激素和免疫抑制剂的治疗后，病情都发生了明显的好转，因此原发性肾病综合征的发生可能与患者的自身免疫状况密切相关。

抗原结合B细胞表面的BCR，而后通过Igα/Igβ转导到B细胞内，这是B细胞活化的第一信号。同时Th细胞上表达的CD154分子与B细胞表面的CD40分子的相互作用为B细胞的有效活化提供第二信号。这是B细胞增殖、生发中心反应以及最终分化为浆细胞的至关重要的信号。此类浆细胞能够合成并分泌针对上述抗原的特异抗体。近年来的研究发现B细胞功能异常在原发性肾病综合征中发挥了重要的作用。激素敏感型肾病综合征患者疾病复发时，其外周血中的B细胞的数量会显著增加，激素依赖型肾病综合征病人体内检测到大量的被活化的B细胞，而处于缓解期的激素敏感型肾病综合征患者体内B细胞的数量则明显下降。同时发现糖皮质激素不能有效的抑制激素敏感型或激素依赖型肾病综合征患者体内B细胞的活化。

环磷酰胺和利妥昔单抗能在激素依赖性的疾病患者体内通过清除B细胞而达到停药后诱导病人的长期缓解。利妥昔单抗可以与前B细胞和成熟B细胞表面的跨膜抗原CD20特异性地结合，通过激活补体，抗体依赖的细胞毒性作用，及诱导细胞凋亡的三种途径来清除B细胞，从而发挥免疫抑制作用。此外，记忆B细胞(特别是转换的记忆B细胞数量)可以预测利妥昔单抗治疗后的复发情况。虽然全球多个多中心的临床研究发现利妥昔单抗能成功的用于微小病变肾病综合征的治疗，但有研究发现利妥昔单抗在治疗激素依赖性肾病综合征的过程中，其清除B细胞的作用能维持大约5个月左右，继后在6到7个月左右随着B细胞的数量回升，病情也会复发。由此可知原发性肾病综合征的患者体内有病理性B细胞的克隆，这些病理性B细胞的克隆的鉴别和精准清除显得尤为重要。

Prelamin A/C是一种较长的前体，在体内会经历一系列的翻译后修饰，从而形成成熟的Lamin A。Lamin A/C基因中的多种突变与不同的疾病相关联，包括肌肉营养不良，扩张型心肌病，早衰综合症等。