[发明专利]一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法

说明书

本发明涉及HE染色技术领域，具体涉及一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法；包括以下步骤：S1、制作骨组织磨片，S2、将骨组织磨片浸于1％的稀盐酸水溶液中，浸泡时间为5‑10min，取出骨组织磨片，对骨组织磨片充分水洗，S3、将骨组织磨片浸入3‑5％的过氧化氢水溶液中，浸泡时间为5‑10min，取出后充分水洗，S4、将表面处理后的骨组织磨片浸于第一染色液中，浸泡时间为30‑45min，S5、将骨组织磨片置于0.5％盐酸酒精分化液中分化10‑30s，取出骨组织磨片充分水洗，S6、将骨组织磨片置于第二染色液中染色2‑5min，取出骨组织磨片水洗；本发明增加了对组织磨片表面的改性处理，使经HE染色后细胞核可以得到很好的着色，解决了经树脂包埋制作的骨磨片HE染色效果不良的问题。

技术领域

本发明涉及HE染色技术领域，具体涉及一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法。

背景技术

HE染色方法是组织病理研究与诊断所使用的常规方法，主要为观察基本组织细胞结构，以及是否有其他病理改变。广泛应用于医学研究领域。通常使用HE染色的病理切片均为石蜡包埋、冰冻切片，以及树脂包埋的薄切片，或直接进行染色，或脱去石蜡及树脂后直接进行染色。对于经树脂包埋后所制作的不脱钙骨或带植体骨组织磨片，因其不能对所使用的包埋树脂进行脱塑，而不能进行HE染色，主要是染色后细胞核不能着色。

树脂包埋后所制作的不脱钙骨或带植体骨组织磨片使用HE染色效果不佳，分析其主要原因是因为树脂在聚合包埋过程中，组织内的所有孔隙均被树脂所充填，形成致密的保护层，使染色液不能浸入组织及细胞内，导致染色后细胞核不着色或着色浅。

在对组织进行包埋中所使用的主要包括两种树脂，一种是光聚合树脂(包埋套装，由德国古沙公司提供)，一种是热聚合树脂(主要成分为甲基丙烯酸甲酯)。其中光聚合树脂是不能进行脱塑的，热聚合树脂包埋后制作的磨片可以脱塑，但脱塑过程中组织的部分内容物也会随之脱去，使组织结构失去其完整性。

另一方面，对于带植入材料的骨组织磨片，因植入材料与骨组织的弹性模量不同，在对最终得到的20微米厚的磨片进行脱塑后，会发生植入材料卷曲、变形或脱落。

因此，对于使用树脂包埋的骨或带植体骨组织磨片进行染色时，是不能通过脱去其包埋材料而进行的。

综上所述，研发一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法，仍是HE染色技术领域中急需解决的关键问题。

发明内容

针对现有技术所存在的上述缺点，本发明在于提供一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法，本发明与现有技术相比，增加了对组织磨片表面的改性处理，使经HE染色后细胞核可以得到很好的着色，解决了经树脂包埋制作的骨磨片HE染色效果不良的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种树脂包埋带植入材料骨组织磨片的HE染色方法，包括以下步骤：

S1、制作骨组织磨片。

S2、将骨组织磨片浸于1％的稀盐酸水溶液中，浸泡时间为5-10min，取出骨组织磨片，对骨组织磨片充分水洗。

S3、将骨组织磨片浸入3-5％的过氧化氢水溶液中，浸泡时间为5-10min，取出后充分水洗。

S4、将表面处理后的骨组织磨片浸于第一染色液中，浸泡时间为30-45min。

S5、将骨组织磨片置于0.5％盐酸酒精分化液中分化10-30s，取出骨组织磨片充分水洗。

S6、将骨组织磨片置于第二染色液中染色2-5min，取出骨组织磨片水洗。

S7、用梯度酒精对骨组织磨片脱水，并用二甲苯对骨组织磨片透明，制成中性树胶封片。