[发明专利]抑制IDOL基因表达的siRNA及其应用

说明书

本发明公开了一种特异抑制诱导低密度脂蛋白受体降解蛋白(IDOL)基因表达的siRNA及其用途。所述siRNA可化学合成，也可根据其序列构建成相应的shRNA重组慢病毒或腺相关病毒等。上述siRNA或shRNA重组病毒转染人肝癌细胞HepG2及小鼠肝癌细胞Hepa 1‑6后可有效抑制IDOL表达，增加低密度脂蛋白受体(LDLR)蛋白水平，从而显著增强肝细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)的活性。上述siRNA或其修饰物或其重组病毒可用于预防和/或治疗高血脂症、动脉粥样硬化等心脑血管疾病、非酒精性脂肪肝、肥胖等病症。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抑制人诱导型低密度脂蛋白受体降解物(IDOL)基因表达的siRNA及其在制备治疗IDOL介导的相关疾病如高血脂症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病、肥胖、糖尿病、肾病等病症药物中的应用。

背景技术

肝脏的低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein recepter，LDLR)在胆固醇平衡中起到至关重要的作用，LDLR的再循环可增强血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)颗粒的有效清除(Jiang et al.(2015)Atherosclerosis 243:523-32)。诱导低密度脂蛋白受体降解蛋白(inducible degrader of the LDLR，IDOL)是一种主要在肝脏中表达的蛋白，在胆固醇代谢中具有重要作用，可影响肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)水平(Zelcer et al.(2009)Science 325:100-4)。IDOL具有E3泛素连接酶活性，可以介导LDLR的泛素化，并在溶酶体中降解，从而导致肝细胞表面LDLR减少，进而降低肝脏清除LDL-C的能力，最终导致血液中LDL-C水平升高(Calkin et al.(2014)Circ Res 115:442-9；Ibranim et al.(2016)Cardiovasc Res 110:23-9)。动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是心血管疾病的基础性病变，其发病率高，危害性大，严重威胁人类生命健康(Johnson et al.(2017)Eur JPharmacol 816:93-106)。

研究表明，高血浆LDL-C与动脉粥样硬化的发展密切相关，降低血浆LDL-C水平可抑制高脂饮食诱导的动脉粥样硬化发展(Tietge(2014)Curr Opin Lipidol 25:94-5；Rader et al.(2008)Nature 451:904-13)。小鼠体内过表达IDOL可显著提高LDL-C水平并导致动脉粥样硬化(Calkin et al.(2014)Circ Res 115:442-9；Bornfeldt et al.(2018)Am J Pathol 188:343-52)，而抑制IDOL表达或敲除IDOL基因可降低体内LDL-C水平(vanLoon et al.(2018)Arterioscler Thromb Vasc Biol 38:1785-95；Hong et al.(2014)Cell Metab 20:910-8)。因此，抑制IDOL可治疗高胆固醇血症及动脉粥样硬化等心血管疾病(Zhang et al.(2016)Med Hypotheses 86:138-42)。此外，IDOL升高与肥胖、代谢紊乱相关(van Loon et al.(2018)Arterioscler Thromb Vasc Biol 38:1785-95)，也与阿尔茨海默病等疾病相关(van Loon et al.(2019)Curr Opin Lipidol 30:192-7)，因此，抑制IDOL表达可成为预防和治疗这些相关性疾病的重要途径。

目前已有多种RNAi药物处于研发阶段或已获批上市，且显示出很好的治疗效果，研制针对特定疾病靶基因表达的RNAi药物已成为治疗这类疾病的重要途径。

发明内容

发明目的：针对上述现有技术存在的技术问题，本发明提供了一种抑制人诱导型低密度脂蛋白受体降解物(IDOL)基因表达的siRNA，还提供了其在制备治疗IDOL介导的相关疾病如高血脂症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病、肥胖、糖尿病、肾病等病症药物中的应用。