[发明专利]一种基于液质联用的血清二氨基庚二酸的检测试剂盒及检测方法与应用

权利要求书

1.一种基于液质联用的血清二氨基庚二酸的检测试剂盒在检测不同严重程度急性胰腺炎中的应用，其特征在于，用于48h内区分中重度急性胰腺炎和重度急性胰腺炎；所述检测试剂盒包括：提取试剂和衍生试剂，所述提取试剂包括二氨基庚二酸标准品和二氨基庚二酸同位素内标，所述衍生试剂包括硼酸盐缓冲液和6-氨基喹啉-N-琥珀酰亚胺甲酯；

采用所述的检测试剂盒处理血清/血浆样本，再联合反相 柱进行色谱分离，利用三重四级杆质谱仪定量分析，检测血清中二氨基庚二酸的含量；

三重四级杆质谱仪的色谱流动相A为0.08％～0.12％甲酸/超纯水，流动相B为0.08％～0.12％甲酸/乙腈。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述二氨基庚二酸同位素内标包括d₄-二氨基庚二酸或氘代赖氨酸的甲醇溶液，浓度为0.5～5ng/mL。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述6-氨基喹啉-N-琥珀酰亚胺甲酯的浓度为5～20mmol/L。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)血清/血浆样本处理：血清/血浆样本采用含有二氨基庚二酸同位素内标的甲醇提取液提取，一次涡旋、离心，取上清液冻干；向冻干后的样本中加入硼酸盐缓冲液，二次涡旋混匀，再加入6-氨基喹啉-N-琥珀酰亚胺甲酯，三次涡旋混匀；室温下静置1±0.2min，55±5℃水浴衍生10±2min；反应后置于冰上1±0.2min；

(2)步骤(1)处理得到的样本先通过反相柱进行色谱分离，再利用三重四级杆质谱仪进行定量分析，定量血清/血浆样本中二氨基庚二酸的含量。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，一次涡旋和二次涡旋的时间均为30±2s；三次旋涡的时间为10±2s；离心的温度为10±2℃。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，血清/血浆样本和含有二氨基庚二酸同位素内标的甲醇提取液的体积比为1:3～1:5。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，质谱检测二氨基庚二酸离子对为266.1＞171.1，碰撞能5～20eV。