[发明专利]人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法

权利要求书

1.一种人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、对LNCaP细胞和基质胶进行处理，得到LNCaP细胞注射液；

S2、通过皮试针抽LNCaP细胞注射液，抽入空气，形成混合物，于雄性裸鼠的右侧前肢腋窝注射混合物；

所述混合物包括0.2mlLNCaP细胞注射液和0.2ml空气。

2.如权利要求1所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述LNCaP细胞注射液为含液体基质胶的LNCaP细胞悬液，液体基质胶和LNCaP细胞悬液的体积相等。

3.如权利要求1所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述对LNCaP细胞和基质胶进行处理，得到LNCaP细胞注射液，包括：

S101、提前将基质胶从-20℃放入4℃的冰箱，使其成为液态；

S102、从T25细胞培养瓶内取出LNCaP细胞，然后将T25细胞培养瓶内陈旧的培养液倒入废液缸内，利用磷酸盐缓冲液对取出的LNCaP细胞进行一次漂洗，加入胰酶，放入培养箱内，于3min后取出；

S103、每个T25细胞培养瓶内加入2ml胎牛血清的DMEM/F12培养基，再把LNCaP细胞放入T25细胞培养瓶内，吹打4~5次后将消化下来的LNCaP细胞吸入15ml离心管内；

S104、将15ml离心管在转速1000rmp的条件下离心3min；

S105、弃上清，再用磷酸盐缓冲液将细胞漂洗2次；

S106、冰上将15ml离磷酸盐缓冲液心管内的细胞悬液充分吹打后，调整细胞浓度为5×10⁶个/ml，在LNCaP细胞悬液内加入等体积的基质胶，轻轻吹打混匀，得到LNCaP细胞注射液。

4.如权利要求3所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述S102到S106在消毒后的超净台上操作。

5.如权利要求3所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述S102取出的LNCaP细胞处于对数生长期。

6.如权利要求1~5任一所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述方法还包括：

每三天观察裸鼠肿瘤初始形成时间，依据以下标准判断移植瘤初始形成：肉眼见到隆起于裸鼠皮肤表面的硬节、直径3mm，且随后的观察逐渐增大为肿瘤形成。

7.如权利要求6所述的人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠皮下移植模型的构建方法，其特征在于，所述方法还包括：

皮下移植瘤形成后，用游标卡尺测量移植瘤的最大长径和最大短径，再计算皮下移植瘤体积，计算公式为：体积=π/6×移植瘤最大长径×移植瘤最大短径×移植瘤最大短径。