[发明专利]一种枸橼酸托法替布缩合杂质及其同系物的制备方法

说明书

本发明公开了一种枸橼酸托法替布缩合杂质及其同系物的制备方法，涉及有机合成技术领域，本发明首次公开了使用制备色谱分离制备枸橼酸托法替布缩合杂质，并得到高纯度的该杂质；同时首次公开了该缩合杂质的具体结构，该杂质未见专利文献报道，能够为提升枸橼酸托法替布原料药的质量提供了重要依据；并且首次公开了该缩合杂质的合成方法，并更换反应条件，分别制备得到其甲酯、正丁酯、异丙酯同系物，其中正丁酯同系物为进口注册标准中明确提及的杂质，而本发明首次公开了其合成方法。

技术领域：

本发明涉及有机合成技术领域，具体涉及一种枸橼酸托法替布缩合杂质及其同系物的制备方法。

背景技术：

枸橼酸托法替布，是由美国辉瑞公司研发的一种JAK抑制剂，适用于甲氨蝶呤疗效不足或对其无法耐受的中度至重度活动性类风湿关节炎(RA)成年患者，可与甲氨蝶呤或其他非生物改善病情抗风湿药(DMARD)联合使用。2012年11月经FDA批准，托法替布片剂在美国上市。2017年3月经CFDA批准，托法替布片在中国上市。

专利CN 200680027901.3公开的枸橼酸托法替布合成方法是以甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺和2,4-二氯吡咯并嘧啶为原料制得中间体1，经钯碳高压加氢氢解制得中间体2，中间体2与氰乙酸乙酯酰化并成盐制得枸橼酸托法替布粗品，合成路线如下：

发明人按照该专利公开的方法制备枸橼酸托法替布，发现粗品中存在如下结构的缩合杂质，其含量大于0.40％(见图1)。粗品需经多次重结晶精制才能将该杂质含量控制在0.10％以下(见图2)，严重影响产品的质量和收率。

托法替布缩合杂质的生成机理是过量的氰乙酸乙酯在碱性条件下发生自身缩合，再与中间体2酰化得到，机理如下：

为了定性研究该缩合杂质，发明人回收处理枸橼酸托法替布粗品的母液，过柱分离富集该杂质粗品，使用制备色谱分离得到纯度较高的该杂质，通过质谱、核磁等手段确认该杂质的结构，再进行定向合成。

在上述基础上又合成出一系列不同酯基的同系物，其中正丁酯同系物为托法替布进口注册标准中明确收载的杂质PF-05198213，产生原因推测与反应溶剂有关。采用正丁醇作为溶剂时，生成的乙酯杂质在碱性条件下与正丁醇发生酯交换而产生该杂质。本发明首次提出杂质PF-05198213的合成方法，为原料药的杂质方法学研究提供研究对照品。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种枸橼酸托法替布缩合杂质的分离纯化和定向合成方法，并更换反应条件合成得到该缩合杂质的甲酯、异丙酯、正丁酯同系物，以此为枸橼酸托法替布原料药的杂质方法学研究提供研究对照品。

本发明所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：

本发明的一个目的是提供一种枸橼酸托法替布缩合杂质，结构式如下：

本发明的第二个目的是提供一种枸橼酸托法替布缩合杂质的分离纯化方法，包括以下步骤：

(1)收集托法替布游离物的滤液，柱层析分离，富集得到杂质粗品；

(2)使用高压制备色谱分离，收集峰高大于100mA的部分，并用高效液相色谱定位各个峰对应的液相出峰时间，确定杂质的出峰时间和制备条件；

(3)多次进样，收集足量产品并浓缩至干，高效液相测定纯度，质谱、核磁确定结构。