[发明专利]一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法

说明书

本发明公开了一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法，将预先制备的无菌卵、无菌饲料、无菌饲养装置准备好后，放置在无菌室内，并检测无污染后，打开风机，打开无菌饲养装置，用无菌工具转移调配好无菌饲料到无菌装置中，在放置无菌卵在无菌饲料上，扣紧无菌装置的顶盖，放置在无菌生产厂区内。本发明的有益效果包括：饲养无菌虫，外界无任何病原微生物进入，可提高成活率，其次，无菌虫因缺乏水平传播微生物，免疫能力相对较弱，可利于冬虫夏草菌的侵染。可为研究微生物与冬虫夏草寄主幼虫之间健康关系提供专业的平台，包括某些疾病的病原研究，微生物间的拮抗作用，病毒病的研究，细菌学研究，真菌感染研究，原虫感染研究。

技术领域

本发明涉及冬虫夏草人工培植领域，具体涉及一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法。

背景技术

冬虫夏草，中药名，为麦角菌科植物冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫的尸体的复合体。冬虫夏草具有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳、补肺益肾、止血化痰、秘精益气等多种功效。冬虫夏草人工培育产业化中，病原微生物较多，导致冬虫夏草寄主幼虫死亡率较高，其他微生物的竞争也导致冬虫夏草寄主幼虫侵染率有所限制，无法实现人工培育冬虫夏草的高产，因此，无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养尤为重要。

发明内容

针对上述现有技术中的不足之处，本发明提供一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法，其通过培养无菌虫避免了杂菌感染，提高了冬虫夏草的纯度。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法，其特征在于：包括以下步骤，

S1、虫卵的无菌处理，将蝙蝠蛾科昆虫交尾卵放置在无菌卵消毒装置内，用浓度为100-300ppm的含氯消毒液浸没消毒5-20分钟，取出，无菌水冲洗尽虫卵表面的消毒剂，得无菌虫卵；

S2、侵染装置的制备，取透明玻璃容器作为侵染盒，侵染盒上设置可密封连接的上盖，上盖上开设透气孔，在透气孔位置设置有无菌滤膜，将侵染盒及上盖进行灭菌处理；

S3、添加无菌饲料，定量称取植物块茎粉、珠芽蓼粉、琼脂、水混合，加热溶解，倾倒入步骤S2制备的侵染盒中，高压蒸汽灭菌，待冷却凝固得到含固体培养基的侵染盒；

S4、制备无菌幼虫饲养瓶，按照步骤S3的方式制备含固体培养基的无菌幼虫饲养瓶；

S5、将步骤S1中得到的无菌卵在无菌室内放置在步骤S3中的侵染盒中，每个侵染盒放入500粒无菌虫卵，待卵孵化幼虫1-3个月内可连接菌种发酵装置将冬虫夏草菌的发酵液通过总管道直接输入到侵染盒中，采用雾状喷洒的方式均匀散布侵染盒中，使得菌种发酵液接触到无菌幼虫体表和幼虫取食的无菌饲料，充分侵染；

S6、把步骤S5中侵染1-3个月后的幼虫按单只分别转移至步骤S4中制得的无菌饲养瓶中，所述无菌饲养瓶中盛装有15-30毫升无菌饲料，每2-4个月转移一次新的无菌饲养瓶直到幼虫发育为僵虫。

进一步地，步骤S1中所述的无菌卵消毒装置包括盛放消毒液的液体槽(1)、盛放虫卵的双层滤膜网(2)、无菌水喷洒装置(3)，所述双层滤膜网(2)通过竖直升降支架设置在所述液体槽(1)上方，所述无菌水喷洒装置(3)设置在所述双层滤膜网(2)上方，所述双层滤膜网向下滑动可完全浸没在所述液体槽(1)内的消毒液中。

进一步地，步骤S3中的植物块茎粉为胡萝卜粉、蕨麻粉一种或两种组合。

进一步地，步骤S3中的无菌饲料成分配比为每100毫升水中添加琼脂1-1.5克、胡萝卜粉3-5克、蕨麻粉2.5-3.5克、珠芽蓼粉1.5-2.5克，调节Ph6.0-6.5。

进一步地，步骤S3中的无菌饲料成分配比为每100毫升水中添加琼脂1-1.5克、胡萝卜粉3-5克、蕨麻粉2.5-3.5克，调节Ph6.0-6.5。