[发明专利]一种从南蛇藤中提取雷公藤内酯甲的方法

说明书

本发明公开一种从南蛇藤中提取雷公藤内酯甲的方法,该方法以南蛇藤为原料，经粉碎，浸泡，超声提取，萃取，硅胶柱层析，ODS柱层析等步骤得到雷公藤内酯甲单体。得率为千分之一，与从雷公藤药材中提取相比，提取率提高5‑10倍，是一种大量提取雷公藤内酯甲的有效方法。

技术领域

本发明涉及天然提取物领域，具体涉及一种从从南蛇藤中提取雷公藤内酯甲的方法。

背景技术

南蛇藤(Celastrus orbiculatus)为卫矛科南蛇藤属植物,又名过山风、黄藤等，主要分布于我国东北、华北、华东、西南地区。南蛇藤的藤、茎、根、果实均可入药，有祛风除湿、活血解毒及消肿抗炎之功效，民间常用来治疗筋骨疼痛、四肢麻木、风湿性关节炎、腰腿痛、闭经、小儿惊风、痧症、痢疾、跌打损伤等病症。

雷公藤内酯甲为中药雷公藤中重要的活性成分，具有抗炎，抗癌等生理活性。目前雷公藤及南蛇腾药材为雷公藤内酯甲提取的主要来源，但经过比较，南蛇藤中雷公藤内酯甲的含量(提取率0.125％)显著高于雷公藤药材(提取率0.01％)，且该药材广泛易得，毒性低。前期虽有专利报道了从南蛇藤中提取雷公藤内酯甲(CN 108603682 A)，但该方法操作需加热提取、反复重结晶，基于上述问题，有必要开发一种简单高效的雷公藤内酯甲的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从南蛇藤中提取雷公藤内酯甲的方法，该方法提取效率高，节约试剂，所得雷公藤内酯甲的纯度较高，不需反复重结晶处理，为雷公藤内酯甲的工业化生产提供基础。

为实现上述目的，本发明包括以下步骤：

(1)将南蛇藤药材粉碎，过20-30目筛，得南蛇藤粉末，加入其重量10～20倍的95％乙醇浸泡24h后进行超声提取，过滤得到南蛇藤提取液；

(2)对(1)中南蛇藤提取液进行减压浓缩处理，得到南蛇藤提取物；

(3)将南蛇藤提取物加水溶解分散后，先用石油醚萃取，回收石油醚层，减压浓缩，得石油醚萃取物，石油醚萃取后剩余水层再用乙酸乙酯进行萃取，回收乙酸乙酯，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；

(4)将(3)中乙酸乙酯萃取物加等体积乙酸乙酯溶解后拌样于2-10倍量100-200目硅胶中，拌样后样品上样于200-300目硅胶柱中，以石油醚-乙酸乙酯(V/V＝9:1)进行洗脱，每250ml洗脱液收集一份，浓缩后进行TLC点板，合并相同成分的的浓缩液，减压浓缩得粗提物；

(5)将(4)中所得粗提物等体积甲醇溶解后，与等体积ODS填料拌样后上样于中低压ODS柱，以流动相甲醇－水进行梯度洗脱[7.5:2.5]，得雷公藤内酯甲晶体。

所得雷公藤内酯甲的结构式如下：

无色针状结晶，mp 320-321℃,HR-ESI-Ms m/z:453.3414[M-H]^-,分子式为C₃₀H₄₆O₃,¹H NMR(400Hz,MeOD)δ:0.79(3H,s),0.86(3H,s),0.92(3H,s),0.93(3H,s),0.99(3H,s),1.03(3H,s),1.18(3H,s),3.23(1H,m,11-H),4.15(1H,d,J＝5Hz),5.31(1H,m)