[发明专利]一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺

说明书

本发明涉及一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺，属于有机物提取的技术领域。一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺，包括以下步骤：(1)微藻培养；(2)原料粉碎；(3)酶解；(4)沉降分离；(5)萃取；(6)分离纯化。本发明选用的海洋微拟球藻LAMB205，是一种富含DHA和EPA的微藻类生物为一种提取DHA和EPA的理想原料。本发明通过酶解以及物理萃取相结合的制备方法，可有效地提高微藻中DHA和EPA的提取效率，收率可以提高至30％以上，所得产品中DHA和EPA的总含量不低于80％。并且本发明的提取方法操作简单，纯化成本低，有利于产品的放大生产。

技术领域

本发明涉及有机物提取的技术领域，具体涉及一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺。

背景技术

DHA，化学名称二十二碳六烯酸，俗称脑黄金；EPA，化学名称二十碳五烯酸。DHA和EPA同属于ω-3系列多不饱和脂肪酸家族中的重要成员，人体必需脂肪酸中亚麻酸的重要转化子体成分之一。经研究发现，DHA和EPA对人体的有益效果有以下几点：(1)有益于婴幼儿的大脑和视力发育；(2)有益于心血管健康；(3)有益于癌症的防治；(4)有助于治疗精神失调。DHA和EPA的传统来源有两种：一是通过深海鱼油提取，二是通过微藻提取。这两种DHA和EPA的获取方式均存在着一定的问题。通过使用鱼油作为原料提取获得的DHA和EPA存有一定鱼腥味，大部分人在食用时无法接受。此外，由于受到鱼的种类以及海洋季节气候等影响，导致了原料的产量及质量的不稳定。采用微藻作为原料提取DHA和EPA，具有原料资源丰富，分离纯化相对简单，获得的DHA和EPA没有鱼腥味道。但是此方法存在着提取效率低、纯化成本高等缺点。这些都是制约行业发展的问题。

发明内容

针对现有技术中采用微藻作为原料提取DHA和EPA存在的提取效率低、纯化成本高等问题，本发明提供一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺，以解决上述问题。

本发明的技术方案为：

一种从微藻中提取DHA和EPA的工艺，包括以下步骤：(1)微藻培养；(2)原料粉碎；(3)酶解；(4)沉降分离；(5)萃取；(6)分离纯化。

进一步的，所述步骤(1)为取微藻，按照1.0×10⁶～1.0×10⁷cfu/L的密度接种于培养池中，控制培养池中氨氮浓度300～370mg/L，总磷浓度20～35mg/L，pH＝6.5～7.5，培养温度20～30℃，光照强度4000～5000lux，光暗比为11:13～15:9，培养周期5～8天。

进一步的，所述微藻为海洋微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)LAMB205，保藏于国家微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20714，保藏日期为2020年10月23日。保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所，邮编：100101，电话：010-64807355。本发明选用的海洋微拟球藻LAMB205，是一种富含DHA和EPA的微藻类生物，相比于现有的微藻类生物，胞内DHA和EPA的含量要多出10～15％，是一种提取DHA和EPA的理想原料。

进一步的，所述步骤(2)为：将步骤(1)培养的含微藻的培养液过滤处理，然后向微藻中加入清水，放入高速匀浆机中进行粉碎处理，得到匀浆液。

进一步的，所述步骤(3)为：控制匀浆液的pH为6.8～7.0，温度23～27℃，向步骤(2)的匀浆液中加入果胶酶或纤维素酶，用量为微藻用量的5％，酶解时间48～60h，得酶解液。

进一步的，所述步骤(4)为：将步骤(3)制备的酶解液进行研磨破壁处理，破壁后离心，离心后将上清液去除，保留沉淀物。

进一步的，所述步骤(5)为：向沉淀物中加入正己烷：乙醇＝3:1的混合萃取剂，进行萃取处理。混合萃取剂的用量为以微藻重量计1～2g/mL，萃取次数为3～5次。萃取结束后，合并萃取液，低温减压浓缩，得粗品。