[发明专利]NRT1.7基因表达的抑制剂在制备衣霉素吸收抑制剂中的应用

说明书

本发明涉及一种NRT1.7基因表达的抑制剂在制备衣霉素吸收抑制剂中的应用。NRT1.7基因是衣霉素转运过程中的关键基因，衣霉素通过NRT1.7基因表达的转运蛋白转运到宿主内而对宿主产生毒害作用，因而导致衣霉素在发挥抗菌、抗病毒等生物活性时副作用大，因而NRT1.7基因表达的抑制剂可以应用于制备衣霉素抑制剂，减小衣霉素的副作用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种NRT1.7基因表达的抑制剂在制备衣霉素吸收抑制剂中的应用。

背景技术

衣霉素(Tunicamycin)是从链霉菌中分离出来的核苷酸抗生素，是一种蛋白质N-糖基化作用抑制剂，其通过抑制天门冬酰胺连接的多糖合成过程中GPT(乙酰氨基葡萄糖-1-P-转移酶)活性来抑制N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸转移到脂质载体上而抑制糖蛋白的合成，从而可以抑制具有被膜(envelope，含糖蛋白)的病毒的繁殖。同时，衣霉素还可以抑制在合成细菌细胞壁的肽聚糖或胞壁酸中必需的拟脂(细菌萜醇、多聚萜醇等)中间产物的形成，进而抑制细菌细胞壁的形成，所以衣霉素对革兰氏阳性菌具有抗菌性。此外，也有研究表明衣霉素还具有抗癌活性，衣霉素类似物可以用于治疗结核病。

然而，在衣霉素的使用过程中发现，衣霉素对动植物的毒性大，副作用大。

发明内容

经本申请的研究发现，NRT1.7基因是衣霉素转运过程中的关键基因，衣霉素被NRT1.7基因表达的转运蛋白转运到机体内而对机体产生毒害作用，这导致衣霉素在发挥抗菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性时副作用大。因此，基于NRT1.7基因，本申请提供一种NRT1.7基因表达的抑制剂在制备衣霉素吸收抑制剂中的应用，以改善传统的衣霉素在使用过程中副作用大的问题。

此外，还提供了一种对衣霉素不敏感的植物的制备方法、包含抑制NRT1.7基因表达的核酸片段或抑制NRT1.7基因表达产物活性的核酸片段的重组载体、转化有上述重组载体的宿主菌和细胞系、以及包括衣霉素和NRT1.7基因表达的抑制剂的药物。

一种对衣霉素不敏感的植物的制备方法，包括以下步骤：

对衣霉素敏感植物进行处理，使得所述衣霉素敏感植物中的NRT1.7基因不表达或表达产物失活，制备对衣霉素不敏感的植物。

在其中一个实施例中，所述对衣霉素敏感植物进行处理的操作包括：敲除所述衣霉素敏感植物中的NRT1.7基因、对所述衣霉素敏感植物中的NRT1.7基因进行D117N突变、或对所述衣霉素敏感植物中的NRT1.7基因进行G250R突变。

在其中一个实施例中，所述对衣霉素敏感植物进行处理的操作包括：采用NRT1.7基因表达的抑制剂对所述衣霉素敏感植物进行处理。

在其中一个实施例中，所述衣霉素敏感植物为单子叶植物。

在其中一个实施例中，所述衣霉素敏感植物为拟南芥。

一种重组载体，所述重组载体用于沉默植物的NRT1.7基因，所述重组载体包含抑制NRT1.7基因表达的核酸片段和编码抑制NRT1.7基因表达产物活性的物质的核酸片段中的至少一种。

一种宿主菌，含有上述的重组载体。

NRT1.7基因表达的抑制剂在制备抗菌药物或抗病毒药物中的应用。

一种药物，包括衣霉素和NRT1.7基因表达的抑制剂。

附图说明

图1为实施例1中筛选对衣霉素不敏感的拟南芥突变体的流程图；

图2为实施例1的野生型拟南芥、#1008拟南芥突变体、#0230拟南芥突变体和bzip28bzip60突变体在含0.05μM衣霉素的MS培养基上培养两周后的植株状况；

图3为NRT1.7基因结构示意图；