[发明专利]一种免疫荧光胶体金纳米微球材料

说明书

本发明公开了一种免疫荧光胶体金纳米微球材料，涉及体外诊断领域，旨在解决现有技术中荧光定量检测结果不易判读，成本高，胶体金为载体的侧向层析检测灵敏度又不高的问题；采用的技术方案是，通过将胶体金纳米微球和荧光量子点纳米微球通过化学键偶联得到的二合一微球，作为侧向层析主要固相载体，可以通过其表面的官能团，与蛋白质、核酸等偶联反应，既有胶体金显色特性，能够实现侧向层析操作简单，结果易判读的特点；又有量子点光学特征，能实现定量检测，以及灵敏度低的问题，同时在实现双重功能的情况下，减少活材以及人工成本。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体为一种具有定性和定量并存的免疫荧光 胶体金纳米微球材料。

背景技术

体外诊断，即IVD(In Vitro Diagnosis)，是指在人体之外，通过对人体 样本(血液、体液、组织等)进行检测而获取临床诊断信息，进而判断疾病或 机体功能的产品和服务。

体外诊断行业与检验医学构成了既相互区别又相互紧密联系的有机整体。 体外诊断行业是检验医学的“工具”和“兵器”，同时检验医学是体外诊断行 业的“用户”和“市场”，两者的共同目的是实施体外诊断。临床诊断信息的 80％左右来自体外诊断，而其费用占医疗费用不到20％。体外诊断已经成为人 类疾病预防、诊断、治疗日益重要的组成部分。

纳米聚合微球的种类多种多样，用在不同的领域中；在IVD领域，侧向 层析技术已经发展多年，以胶体金为代表的定性检测，已不能满足人们的需求， 定量检测逐渐开始发展。而在侧向层析方向，多用荧光微球作为载体材料，进 行定量检测。

荧光微球是一类特殊的功能性微球，其通常具有纳米级至微米级的直径， 并且在表面包覆有荧光物质或者在结构内附载有荧光物质，在激发光下可以发 射出荧光。由于结构稳定以及发光效率稳定等特点，荧光微球现已广泛地应用 在标记、示踪、检测、体内成像、免疫医学、高通量药物筛选等领域中。

在IVD领域，胶体金检测试纸条的结果易判读特点，检测成本低，使得 胶体金能够进入到日常的家庭生活中，但荧光定量检测的侧向层析则不能满足 这一要求，由于需要配套的定量检测设备，也使得成本大幅增加。

而在以胶体金为载体的侧向层析检测中，定量以及灵敏度的问题一直困 扰着各大体外诊断试剂盒研发厂家。但是既能实现定性简单易判读又能辅助提 升灵敏度，以及实现定量的固相载体材料，市场上没有实现。

目前有些厂家为了能够同时实现定性与定量的功能，通常将胶体金标记 物与荧光标记物进行混合，虽能实现定性与定量的功能，但是会造成活性材料 的投入加倍，同时人工等成本由于两种材料的标记和使用，而成倍增加。

发明内容

鉴于现有技术中所存在的问题，本发明公开了一种免疫荧光胶体金纳米 微球材料，采用的技术方案是，包括胶体金纳米微球、荧光量子点纳米微球、 纳米微球表面聚合物修饰基团，所述胶体金纳米微球表面官能化，并通过化学 键与荧光量子点纳米微球偶联，直径可以为10-500nm，荧光发射波长范围 400-800nm，在此基础上，仍保留胶体金纳米微球的显色特征。

作为本发明的一种优选技术方案，所述胶体金纳米微球表面的官能团可 以为羧基、氨基、醛基、环氧基、磺酸基、氯甲基、羟基等；本纳米微球可以 用于IVD领域中，作为侧向层析的固相载体材料，可以通过其表面的官能团， 与蛋白质、核酸等偶联反应，并在侧向层析中，既能通过胶体金的性能实现定 性判定，也能通过检测量子点的发射光进行定量读数。

作为本发明的一种优选技术方案，所述荧光量子点纳米微球偶联在所述 胶体金纳米微球表面。

作为本发明的一种优选技术方案，所述胶体金纳米微球偶联在所述荧光 量子点纳米微球表面。

本发明公开了一种免疫荧光胶体金纳米微球材料的制备方法，采用的技 术方案是，包括以下步骤：

步骤a，对胶体金纳米微球表面进行覆膜保护；