[发明专利]一种快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器

权利要求书

1.一种快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，包括CEA变构适配体荧光探针；

所述CEA变构适配体荧光探针为发夹结构；

所述CEA变构适配体荧光探针包括互补序列、链接序列和CEA识别序列；

所述CEA变构适配体荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述互补序列末端采用荧光染料修饰；所述识别序列末端采用荧光淬灭基团修饰。

3.根据权利要求2所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述互补序列末端采用羧基荧光素修饰；所述识别序列末端采用黑洞猝灭基团修饰。

4.根据权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述互补序列与所述识别序列发生碱基互补，并通过所述链接序列相连接形成发夹结构。

5.根据权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述核苷酸序列SEQ ID NO:1的5’端的9个碱基和3’端的9个碱基形成反向互补。

6.根据权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述互补序列长度为5-11bp。

7.根据权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述CEA变构适配体荧光探针和CEA结合时，采用实时定量 PCR 仪进行检测。

8.根据权利要求7述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，采用实时定量 PCR 仪进行检测的温度为4-20℃。

9.根据权利要求7述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器，其特征在于，所述实时定量 PCR 仪进行检测时，探针溶液和待测样品的体积比为1：1~20。

10.一种如权利要求1所述快速高通量检测癌胚抗原的适配体生物传感器的制备方法，其特征在于，具体制备步骤如下：

1）通过化学合成方法制备出寡聚核苷酸；所述寡聚核苷酸的核心序列如SEQ ID NO:1所示；

2）通过化学合成的方法对上述寡聚核苷酸的5‘端修饰上荧光基团，3’端修饰上荧光猝灭基团，得到变构适配体荧光探针；

3）将变构适配体荧光探针溶解于水中，配置成浓度为0.05~5uM的适配体探针溶液；

4）向qPCR反应管中加入上述适配体探针溶液，同时加入待测样品，使探针溶液和待测样品的体积比为1：1~20；

5）将上述qPCR反应管放入定量PCR仪中，在4-20℃条件下检测反应管中溶液的荧光信号。