[发明专利]CD200+亚群脐带间充质干细胞的培养方法及其所用的培养基

说明书

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种CD200+亚群脐带间充质干细胞的培养方法及其所用的培养基。该培养基为添加如下成分的DMEM/F12培养基：8v/v％～12v/v％FBS、FGF 8ng/ml～12ng/ml、BDNF 10ng/ml～30ng/ml以及NT3 10ng/ml～30ng/ml。利用该培养基对CD200⁺亚群脐带间充质干细胞进行培养能够大大加快脊髓损伤的修复。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种CD200+亚群脐带间充质干细胞的培养方法及其所用的培养基。

背景技术

“脊髓损伤”(Spinal Cord Injury)一词是指由创伤(如撞车)、疾病或退化(如癌症)造成的脊髓损坏。目前没有关于全球患病率的可靠估计，但大多是由创伤造成，尽管非创伤性脊髓损伤的比例呈现上升趋势。脊髓损伤的症状取决于损伤的严重程度和受损脊髓的位置。症状可能包括胳膊、腿和/或身体的感觉功能或运动控制部分或完全丧失。最严重的脊髓损伤会影响调节尿便控制、呼吸、心率和血压的身体系统。大多数脊髓损伤者会经历慢性疼痛，脊髓损伤有引发继发性疾病的危险，这些疾病——如深静脉血栓、尿道感染、肌肉痉挛、骨质疏松、褥疮、慢性疼痛和呼吸道并发症，可能导致衰弱，甚至危及生命。急救护理、康复服务和持续的健康维护对预防和管理这些疾病至关重要。其后果是终身性和毁灭性的，不仅给病人造成极大的痛苦，也给家庭和社会带来沉重的负担。

目前针对脊髓损伤的治疗手段主要包括手术、药物、物理、基因以及细胞移植等多种治疗方法。外源性干细胞移植是近几十几年来脊髓损伤治疗的研究热点，简单来说，主要分为胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)和成体干细胞(adult stem cells，ASCs)两类，其中ASCs包括来源于胎儿、新生儿以及成年机体组织的干细胞。近些年来，用于脊髓损伤治疗的干细胞主要有胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)、神经干细胞(neuralstem cells，NSCs)以及间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)等。

MSC是一种多能干细胞，在胎儿附属物如羊膜、羊水、脐带及脐血中亦发现有丰富的MSCs，它们可以称为介于成体干细胞和胚胎干细胞之间的类型，可能具有更低的免疫原性、更高的增殖能力以及来源更方便等独特的优越性。其中脐带来源的MSCs更丰富，一根脐带可制备相当于约5000毫升骨髓来源的间充质干细胞。故而，深入研究脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的作用并探讨其机制具有重要的意义。

现有技术曾有报道CD200⁺亚群脐带间充质干细胞具有抑制免疫排斥反应的作用，但其功能单一，促进脊髓损伤修复的能力并不强。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种CD200⁺亚群脐带间充质干细胞培养基，其为添加如下成分的DMEM/F12培养基：

8v/v％～12v/v％FBS、FGF 8ng/ml～12ng/ml、BDNF 10ng/ml～30ng/ml以及NT310ng/ml～30ng/ml。

可选的，如上所述的CD200⁺亚群脐带间充质干细胞培养基，其为添加如下成分的DMEM/F12培养基：

9v/v％～11v/v％FBS、FGF 9ng/ml～11ng/ml、BDNF 15ng/ml～25ng/ml以及NT315ng/ml～25ng/ml。

可选的，如上所述的CD200⁺亚群脐带间充质干细胞培养基，其为添加如下成分的DMEM/F12培养基：

10v/v％FBS、FGF 9ng/ml～11ng/ml、BDNF 15ng/ml～25ng/ml以及NT3 15ng/ml～25ng/ml。