[发明专利]巨型病毒或巨型噬菌体来源氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法及正交体系

权利要求书

1.一种巨型病毒或巨型噬菌体来源的氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法，其特征是，包括以下步骤：

第一步、对现有巨型病毒及巨型噬菌体的基因组进行分析，并从中选择一组来源于巨型病毒或巨型噬菌体的候选氨酰tRNA合成酶；

第二步、搜寻原核细胞内候选配对tRNA，或者搜寻真核细胞内候选配对tRNA；

第三步、在预设原核宿主中，将候选氨酰tRNA合成酶与原核细胞内候选配对tRNA分别配对，检测其正交性，并获得原核正交体系；或者，在预设真核宿主中，将候选氨酰tRNA合成酶与真核细胞内候选配对tRNA分别配对，检测其正交性，并获得真核正交体系。

2.根据权利要求1所述的巨型病毒或巨型噬菌体来源的氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法，其特征是，所述候选氨酰tRNA合成酶为酪氨酰tRNA合成酶；所述候选配对tRNA为与酪氨酰tRNA合成酶对应的Tyr-tRNA。

3.根据权利要求1所述的巨型病毒或巨型噬菌体来源的氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法，其特征是，第二步中，在搜寻前，根据第一步所得候选氨酰tRNA合成酶的多肽序列构建生物进化树，并判断是否有候选氨酰tRNA合成酶接近真核生物或古生菌、或者接近细菌；

若有候选氨酰tRNA合成酶接近真核生物或古生菌，则判断该候选氨酰tRNA合成酶在原核细胞中具有正交可能性；

若有候选氨酰tRNA合成酶接近细菌，则判断该候选氨酰tRNA合成酶在真核细胞中具有正交可能性。

4.根据权利要求3所述的巨型病毒或巨型噬菌体来源的氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法，其特征是，第二步中，在搜寻原核细胞内候选配对tRNA时，搜寻目标包括：第一步涉及的所有或部分巨型病毒、或者所有或部分巨型噬菌体，所述部分巨型病毒或部分巨型噬菌体的宿主或潜在宿主，含有与预定候选氨酰tRNA合成酶序列类似的氨酰tRNA合成酶的微生物；

其中，所述部分巨型病毒为含有候选氨酰tRNA合成酶、且该候选氨酰tRNA合成酶在原核细胞中具有正交可能性的巨型病毒；

所述部分巨型噬菌体为含有候选氨酰tRNA合成酶、且该候选氨酰tRNA合成酶在原核细胞中具有正交可能性的巨型噬菌体；

所述预定候选氨酰tRNA合成酶有至少一个，且选自在原核细胞中具有正交可能性的候选氨酰tRNA合成酶；

在判断氨酰tRNA合成酶是否与预定候选氨酰tRNA合成酶序列类似时，采用生物大分子序列比对搜索工具BLAST进行比对并按预设条件进行鉴别；

搜寻过程包括：在搜寻目标的基因组数据中搜寻并获取与候选氨酰tRNA合成酶对应的候选配对tRNA。

5.根据权利要求3所述的巨型病毒或巨型噬菌体来源的氨酰tRNA合成酶/tRNA正交体系构建方法，其特征是，第二步中，在搜寻真核细胞内候选配对tRNA时，搜寻目标包括：第一步涉及的所有或部分巨型病毒、或者所有或部分巨型噬菌体，所述部分巨型病毒或部分巨型噬菌体的宿主或潜在宿主，含有与预定候选氨酰tRNA合成酶序列类似的氨酰tRNA合成酶的微生物；

其中，所述部分巨型病毒为含有候选氨酰tRNA合成酶、且该候选氨酰tRNA合成酶在真核细胞中具有正交可能性的巨型病毒；

所述部分巨型噬菌体为含有候选氨酰tRNA合成酶、且该候选氨酰tRNA合成酶在真核细胞中具有正交可能性的巨型噬菌体；

所述预定候选氨酰tRNA合成酶有至少一个，且选自在真核细胞中具有正交可能性的候选氨酰tRNA合成酶；

在判断氨酰tRNA合成酶是否与预定候选氨酰tRNA合成酶序列类似时，采用生物大分子序列比对搜索工具BLAST进行比对并按预设条件进行鉴别；

搜寻过程包括：在搜寻目标的基因组数据中搜寻并获取与候选氨酰tRNA合成酶对应的候选配对tRNA。