[发明专利]一种玉米中硒形态的分析方法

说明书

本发明公开了提供一种玉米中硒形态的分析方法，首次提出采用微波辅助酶萃取‑高效液相色谱‑电感耦合等离子体质谱联用技术测定玉米中硒形态的分析方法，实现了硒酸盐、亚硒酸盐、硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸同时分析。与现有的技术相比，本方法首次提出采用微波辅助酶萃取‑高效液相色谱‑电感耦合等离子体质谱联用技术测定玉米中硒酸盐、亚硒酸盐、硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸四种硒形态，通过大批量样品的应用，此方法有以下优点：该方法萃取时间短、操作简单、精密度和准确度良好，为富硒玉米中硒形态分析提供了切实可行的方法，在富硒农产品中硒形态分析领域具有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及玉米中硒含量测定技术领域，更具体地说是一种玉米中硒形态的分析方法。

背景技术

硒是人体和动物必需的微量元素之一，在体内充当多种含硒酶如谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心，发挥着抗氧化，保护细胞膜免受氧自由基氧化损伤的作用，此外还具有提高机体免疫力以及消除重金属积累等生理生化功能。硒的生物有效性以及毒性不仅取决于硒的总量，而且与硒的化学形态密切相关，例如亚硒酸盐的毒性大于硒酸盐，硒化氢的毒性最大，而硒代氨基酸等有机硒的生物利用率较高,因此硒形态分析具有重要意义。

玉米是我国主要粮食作物之一，目前玉米中硒含量测定的国家标准方法《GB5009.93-2017食品安全国家标准食品中硒的测定》只能测定硒的总量。建立简单快速准确的测定方法，了解玉米中硒的形态具有重要意义。微波萃取具有萃取速度快、萃取效率高及操作简便等优点。高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(high performance liquidchromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry，HPLC-ICP-MS)联用具有准确、快速、灵敏度高、接口相对简单等优点，在元素形态分析中得到广泛应用。本发明采用微波辅助酶萃取的方式对玉米样品进行萃取，并采用HPLC-ICP-MS联用技术测定萃取液中亚硒酸盐、硒酸盐、硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸四种常见硒形态，该方法萃取时间短、操作简单、精密度和准确度良好，为玉米样品硒形态分析提供了切实可行的方法。

发明内容

本发明首次提出采用微波辅助酶萃取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定玉米中硒形态的分析方法，实现了硒酸盐、亚硒酸盐、硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸同时分析。本发明的目的有：

(1)为玉米样品中硒形态分析提供切实可行的方法，更加全面和具体的了解玉米中硒的含量和存在的形态。

(2)为生产富硒农产品及保证富硒农产品质量安全提供科学依据，为指导富硒产品的开发，发展富硒产业、拉动地方经济发展开辟提质增效新路径。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种玉米中硒形态的分析方法，包括以下方法：

S1、试剂和材料准备

1.1.1所用的玻璃器皿均需用20％硝酸浸泡12小时以上，用水反复冲洗干净；所有试验用水均为GB/T 6682规定的一级水；

1.1.2硝酸：优级纯；

1.1.3柠檬酸：优级纯；

1.1.4氨水：优级纯；

1.1.5甲醇：色谱纯；

1.1.6蛋白酶XIV：纯度98％；

1.1.7硒酸根标准溶液(GBW10033)：购自中国计量科学研究院；

1.1.8亚硒酸根标准溶液(GBW10032)：购自中国计量科学研究院；

1.1.9硒代蛋氨酸：纯度98％；

1.1.10硒代胱氨酸：纯度98％；