[发明专利]一种菌酶联合降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的方法

权利要求书

1.一种菌酶联合降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的方法，其特征在于所述方法为：以变栖克雷伯氏菌SY1(Klebsiella variicola SY1)经扩大培养获得的细胞悬液和南极假丝酵母角质酶为催化剂，以聚对苯二甲酸乙二醇酯为底物，以pH 7.0-9.0的缓冲液为反应介质构成反应体系进行降解反应，降解反应过程中，底物和南极假丝酵母角质酶先加入缓冲液中，60℃降解反应5天后，再加入变栖克雷伯氏菌SY1细胞悬液，30℃降解1天后升温至60℃继续降解5天，使聚对苯二甲酸乙二醇酯高聚物降解为单体化合物；所述变栖克雷伯氏菌SY1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020198，保藏日期2020年6月10日，地址中国武汉，武汉大学，邮编430072。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述缓冲液为pH 8.0、50-100mM Tris-HCl缓冲液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述聚对苯二甲酸乙二醇酯结晶度为10-30％。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述聚对苯二甲酸乙二醇酯为lcPET或boPET，其中lcPET为结晶度11.62％的塑料颗粒；boPET为结晶度26.49％的塑料膜。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述底物加入量以缓冲液体积计为1-5mg/mL。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述南极假丝酵母角质酶为南极假丝酵母角质酶HiC，所述南极假丝酵母角质酶HiC加入量以蛋白含量计为10-50μg/mL缓冲液。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述细胞悬液是将变栖克雷伯氏菌SY1接种至LB培养基，30℃培养1天至对数生长期，然后用PBS缓冲液洗涤三次，最后将菌体重悬于PBS缓冲液中，获得细胞悬液；所述缓冲液中细胞悬液加入量为2～8×10⁹cfu/mL。