[发明专利]一株高效裂解碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一株高效裂解碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用。本申请从西南医科大学附属医院污水处理厂的污水中分离出一株可裂解多重耐药肺炎克雷伯菌17‑11的烈性噬菌体，属于有尾噬菌体目(Caudovirales)、肌尾噬菌体科(Myoviridae)。该噬菌体的最佳感染复数为0.001，且具有较高的复制效率，指数生长期的爆发量约为31.7PFU/CELL。该噬菌体具有较宽的温度耐受范围，pH稳定性较好，且对肺炎克雷伯菌的特异性强。体外抗菌实验表明该噬菌体对宿主肺炎克雷伯菌17‑11有显著的抑制作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一株高效裂解碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用。

背景技术

随着产超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum betalactamases，ESBLs)和碳青霉烯酶(carbapenemases)的肺炎克雷伯菌的出现，多重耐药的肺炎克雷伯菌为公共卫生安全带来了极大威胁。现有的抗生素已无法满足临床需要。为此，如何高效的抑制多重耐药肺炎克雷伯菌，成为了一项亟待解决的问题。

而作为细菌“天然杀手”的噬菌体由于其数量繁多、抗菌活性高的特点，近年来被越来越多地用于治疗多重耐药菌的感染。噬菌体(bacteriophage)作为自然界中存在数量最多的物种，是一株可感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。其作为“抗菌素”用于治疗细菌感染已有将近一个世纪的历史，格鲁吉亚和俄罗斯等国均具有丰富的噬菌体治疗经验。美国和欧洲也有进入临床试验的规模化噬菌体制剂。相比人工合成的抗生素，噬菌体所具有的天然优势使其更加适合于临床治疗。首先噬菌体具有极高的宿主特异性，几乎只对宿主细菌产生作用，不影响人体的细胞和正常菌群。其次，噬菌体对宿主菌具有极高的灭菌活性，并且噬菌体作为活的病毒可以依靠宿主进行繁殖，达到“边杀菌边繁殖”的放大效应，无需大量、多次给药可减轻患者痛苦。最后噬菌体数量繁多且易于分离，研发噬菌体制剂的时间成本和经济成本较低，更具有经济价值。

由于噬菌体对宿主菌具有高度的特异性，所以单一噬菌体的裂解范围较抗生素小。本申请旨在通过分离对多重耐药肺炎克雷伯菌特异性强、裂解效率高的噬菌体，并通过研究其生物学特性和全基因组进一步筛选适合用于临床的噬菌体以达到对细菌的抑制作用。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一株高效裂解碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。

本发明是这样实现的，一株高效裂解碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌噬菌体，保藏编号为CCTCC NO:M 2021408，培养物名称为T4-like viruses sp.vB_kpnM_17-11，于2021年4月19日保藏至中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学。

本发明还披露了如上述的噬菌体在裂解肺炎克雷伯菌中的应用。

本发明还披露了如上述的噬菌体在制备裂解肺炎克雷伯菌的药物中的应用。

进一步地，所述肺炎克雷伯菌包括多重耐药肺炎克雷伯菌。

进一步地，所述多重耐药肺炎克雷伯菌包括多重耐药肺炎克雷伯菌Klebsiellapneumoniae17-11。

进一步地，所述应用的具体方法为将所述噬菌体与肺炎克雷伯菌混合后共培养。

进一步地，所述肺炎克雷伯菌包括碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌。

本发明还披露了如上述的噬菌体在处理含肺炎克雷伯菌的污水中的应用。

综上所述，本发明的优点及积极效果为：