[发明专利]一种生物转化米格列醇中间体的方法

说明书

本发明属于医药技术领域，涉及一种生物转化米格列醇中间体的制备方法，具体为一种应用流加中间体I进行生物转化成米格列醇中间体II的方法。转化罐中投入菌体溶液后，调控温度和溶氧，通过流加中间体I和流加碱液的方式控制pH，得到中间体II，经过氢化得到米格列醇，本发明优化工艺使米格列醇的纯度、收率提高，节省了初始调节中间体I用的酸液，也大大减少了反应中消耗的碱液，绿色环保，且流加可控，能随时掌控反应速度和进程，适合工业生产。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种生物转化米格列醇中间体的制备方法。

背景技术

糖尿病是最为常见的一种内分泌代谢失调引起的疾病，主要分为I型糖尿病(胰岛素依赖性糖尿病，IDD)和II型糖尿病(非胰岛素依赖性糖尿病，NIDD)。随着人民生活水平的提高和营养结构的改善，糖尿病作为慢性非传染性疾病正在呈流行趋势。其中，又以II型糖尿病为主。

1966年，在链霉菌的发酵液中首次发现了野尻霉素(nojirimycin)，四年后发现它对β-糖苷酶具有强烈的抑制作用，成为第一个被发现的淀粉酶抑制剂。由野尻霉素还原得到的1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)及其一系列的衍生物同样具有糖苷酶抑制作用，N-取代-1-脱氧野尻霉素的降糖作用最为明显，米格列醇就是其中之一。

米格列醇(N-羟乙基-1-脱氧野尻霉素)是1-脱氧野尻霉素的母体修饰物，结构与葡萄糖相似。作为第一个假单糖类α-葡萄糖苷酶抑制剂，因其明显的降糖效果、且安全有效、一般耐受性良好，已成为治疗II型糖尿病的首选药物。

现在米格列醇的生产中大都采用化工合成和结合生物催化。先用葡萄糖胺化生成N-羟乙基葡萄糖胺(中间体I)，再生物转化成6-(取代氨基)-6-脱氧-α-L-呋喃山梨糖(中间体II)，最后氢化生成N-羟乙基-1-脱氧野尻霉素即米格列醇。在生物转化中间体I(N-羟乙基葡萄糖胺)的过程中，生产厂家大都先把中间体I用酸调好pH，再加入菌体，控制温度和溶氧，流加碱液调节pH，反应结束后，收集滤液再氢化，最终得米格列醇。此生物转化过程中，初期反应剧烈，且加碱液量大，中后期趋于平稳，使用酸调中间体I，再加碱液调生物转化过程中pH，造成浪费。

发明内容

克服现有技术不足，本发明提供了一种生物转化米格列醇中间体的制备方法，采用流加中间体I的方法进行生物转化，通过流加中间体I和碱液的方式共同控制溶液保持pH＝5.0-5.6，节省了初始调节中间体I用的酸，也大大减少了反应中用的碱液，且流加可控，能随时掌控反映的速度和进程，适合工业生产，绿色环保。

本发明的第一个目的在于一种米格列醇中间体的制备方法，将菌体投入生物转化灌，采用流加米格列醇中间体I的方式进行生物转化，得到米格列醇中间体II。

所述的米格列醇中间体I为N-羟乙基葡萄糖胺；米格列醇中间体II为6-(取代氨基)-6-脱氧-α-L-呋喃山梨糖；所述菌体为氧化葡萄糖酸菌。

进一步的，所述在流加米格列醇中间体I时pH控制为5.0-5.6。

进一步的，所述在流加米格列醇中间体I时可流加碱液，共同调控pH为5.2-5.4。

具体的，生物转化方法是流加中间体I，pH变化与流加速度相关，pH值上升迅速，则适当降低流加速度，pH值下降则适当提高流加速度。

其中，所述碱液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钙溶液中的一种或多种。

具体的，所述碱液为氢氧化钠溶液，优选为质量分数为10％氢氧化钠溶液。

进一步的，所述菌体和米格列醇中间体I的体积比为0.6-1.4:1，优选为0.8-1.2:1。

所述生物转化反应中，温度控制27-32℃，通气量0.2-0.4vvm，罐压0.04-0.06MPa，溶氧始终≥30％。