[发明专利]一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基及培养方法

权利要求书

1.一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基，其特征在于，包括：

(1)诱导培养基1：

在MS培养基的基础上添加2，4-D 1-2mg/L，玉米素0.3-1.2mg/L，KT 0.1-0.2mg/L，脯氨酸15-25mg/L，亮氨酸0.5-1mg/L，壳聚糖0.2-0.5g/L；

和

(2)诱导培养基2：

在MS培养基的基础上添加2，4-D 2-3mg/L，玉米素0.8-1.8mg/L，KT 0.1-0.2mg/L，硫代硫酸钠0.1-0.2g/L，脯氨酸30-40mg/L，酪氨酸20-30mg/L，壳聚糖0.8-1.2g/L，活性炭粉0.3-0.6g/L。

2.根据权利要求1所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基，其特征在于，所述活性炭粉粒度为200-300目。

3.一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)取2-3年生紫椴具有腋芽的嫩枝段，消毒，剪至2.5-3.5cm长，作为外植体；

2)将外植体接种于权利要求1所述的诱导培养基1上，20±2℃暗培养3-5d；

3)将步骤2)暗培养后的外植体转移到权利要求1所述的诱导培养基2上，25±2℃继续暗培养10-14d。

4.根据权利要求3所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法，其特征在于，

步骤1)中的消毒为：

流水冲洗2-5min，使用洗衣粉漂洗2-3min，再用流水冲洗2-5min，于质量分数75％的酒精中浸泡30-50s，转入质量分数0.1％氯化汞中浸泡8-12min，无菌水洗涤3-5次。

5.根据权利要求3或4所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法在紫椴无性繁殖中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，

将权利要求3或4获得的愈伤组织转接于分化培养基中，25±2℃培养10-14d；再转接到生根培养基中，生根后进行移栽。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

所述分化培养基组成如下：

在MS培养基的基础上添加6-BA 1.0-2.0mg/L，NAA 0.5-1.0mg/L。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

分化培养基中培养时，光照强度1000-1500lx，光照时间8-10h/d。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

所述生根培养基组成如下：

在MS培养基的基础上添加NAA0.3-0.5mg/L。

10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

生根培养基中培养时，光照强度1500-2000lx，光照时间10-12h/d。