[发明专利]一种甘蔗组培苗繁殖的方法

说明书

本发明涉及生物技术技术领域，具体公开了一种甘蔗组培苗繁殖的方法。该方主要包括（1）配制含有甲磺酰菌唑和全氟辛基季铵碘化物的抑菌液剂（2）配制基于MS基本培养基的增殖培养基（3）配制含抑菌液剂的生根培养基（4）培养容器消毒（5）增殖培养基消毒（6）组培苗增殖培育（7）生根培养。利用该方法进行甘蔗组培苗繁殖，感染病菌风险低，增殖倍数高，甘蔗组培苗生长氧气充足，生根率高，移栽存活率高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种甘蔗组培苗繁殖的方法。

背景技术

甘蔗属温带和热带农植物，是制作食糖的主要原料来源，其种植面积和产糖量均占我国糖料作物、食糖产量的90％以上，而且，甘蔗还可用于提炼乙醇作为能源替代品。甘蔗含糖量最为丰富，其中的蔗糖、葡萄糖及果糖，含量达12％，极易被人体吸收利用。此外，经科学分析，甘蔗还含有人体所需的其它物质，甘蔗还含有多量的铁、钙、磷、锰、锌等人体必需的微量元素，其中铁的含量特别多，居水果之首，另外，甘蔗还具有一定的药用价值。

组培苗具有保持母本的优良性状，广泛用于多种作物优良品种品种繁殖，因此，采用组织培育技术进行优良品种的甘蔗组培苗繁殖，提高甘蔗组培苗增殖倍数，降低甘蔗组培苗繁殖过程中感染病菌风险，提高甘蔗组培苗移栽存活率高有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种甘蔗组培苗繁育的方法，利用该方法进行甘蔗组培苗繁殖，感染病菌风险低，增殖倍数高，甘蔗组培苗生长氧气充足，生根率高，移栽存活率高。

为实现上述目的，本发明提供了一种甘蔗组培苗繁育的方法，包括以下步骤：

(1)抑菌液剂配制：配制含有甲磺酰菌唑和全氟辛基季铵碘化物的抑菌液剂；

(2)增殖培养基配制：配制含有MS基本培养基、玉米素和青蒿烯的增殖培养基；

(3)生根培养基配制：配制含有步骤(1)制备的抑菌液剂的生根培养基；

(4)培养容器消毒：采用步骤(1)配制的抑菌液剂对培养容器进行灭菌处理，并在无菌条件下晾干备用；

所述培养容器包括塑料盒、穴盘和空气过滤瓶三部分：

所述塑料盒为透明材料制成，包括塑料盒主体(1)和盖(2)两部分，塑料盒主体(1)离盒底0.2-0.5厘米处设有1个换气孔(8)；盖体上有两个直径0.8-1.0厘米盖体换气孔(3)，盖体与主体经过卡扣密封；

所述穴盘为活动型，可拆卸地放置在所述盒主体底部，在塑料盒内，用于承载组培小苗，穴盘有12-20个穴孔；

所述空气过滤瓶(4)瓶口带有一个瓶塞(5)，瓶塞插有两根导管，所述两根导管插入到空气过滤瓶部分的垂直长度不相同，与瓶底垂直距离远的出气导管(6)与塑料盒主体换气孔(8)接通，与瓶底垂直距离近进气导管(7)用于通入空气；

(5)增殖培养基消毒：取步骤(2)制备的增殖培养基加入步骤(1)中制备的抑菌液剂煮沸1-2分钟，然后分装到消毒好的培养容器穴盘穴孔内，培养基深0.8-1.2厘米；

(6)组培苗增殖培育：在空气过滤瓶加入双氧水溶液，直到液面在空气过滤瓶中两导管管口之间，并向与瓶底距离近进气导管持续通入空气；

将甘蔗组培增殖苗分成2-3株小丛苗，放入上述培养盒穴盘穴孔内培养，盖上塑料盒盖体，培养一段时间蔗苗长满穴孔。

(7)生根培养：甘蔗组培苗长满穴孔后，通过培养容器塑料盒盖体气孔加入生根培养基，组培苗长根后移栽大棚。

优选的，上述技术方案中，步骤(1)所述甲磺酰菌唑和全氟辛基季铵碘化物质量比为1:5～1:10，所述甲磺酰菌唑和全氟辛基季铵碘化物总质量在抑菌液剂占比为0.5％～6％。