[发明专利]一种山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法

权利要求书

1.一种山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，包括以下步骤:

S1，将山茱萸籽干燥后粉碎，脱脂，得脱脂后的山茱萸籽粉末；将脱脂后的山茱萸籽粉末均匀分散于水溶剂中，并将其置于亚临界反应釜中进行水热反应，冷却至室温后抽滤，得到提取液；

S2，利用活性炭将提取液中的有色杂质去除，获得澄清的粗多糖溶液，随后向粗多糖溶液中加入Sevage试剂，振荡使Sevage试剂均匀分散于粗多糖溶液后静置，收集上清液，获得脱蛋白多糖溶液；将所得脱蛋白多糖溶液减压浓缩，真空冷冻干燥，得到山茱萸籽多糖粗品；

S3，将获得的山茱萸籽多糖粗品依次使用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100柱进行洗脱，将洗脱液真空冷冻干燥，即得到山茱萸籽多糖纯品。

2.如权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，所述水热反应是在120～200℃下反应3～60min。

3.如权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，将所述山茱萸籽多糖粗品置于DEAE-52纤维素柱上，依次用蒸馏水、NaCl溶液进行分级洗脱，收集洗脱液，得到含有初步纯化的山茱萸籽多糖溶液。

4.如权利要求3所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，将所含有初步纯化的山茱萸籽多糖溶液置于Sephadex G-100柱上，用蒸馏水对其进行洗脱，收集洗脱液并将其进行真空冷冻干燥，得到山茱萸籽多糖纯品。

5.如权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，所述Sevage试剂为氯仿:正丁醇＝4:1，v/v的混合液，所述粗多糖溶液与所述Sevage试剂的体积比为1:4～6。

6.如权利要求5所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，加入Sevage试剂后，振荡使Sevage试剂均匀分散于粗多糖溶液后静止，弃取中间蛋白层和下层，重复多次至无明显的中间蛋白层，收集上层的浓缩多糖溶液，获得脱蛋白多糖溶液。

7.如权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，步骤S2中，所述活性炭与提取液的用量比为1g：40～60mL。

8.如权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，步骤S1中，所述山茱萸籽干燥至含水量10％以下，粉碎至粉末能通过80目筛。

9.权利要求1所述的山茱萸籽多糖的分离提取与纯化方法，其特征在于，步骤S1中，使用石油醚脱脂，脱脂后将石油醚挥干，得到脱脂后的山茱萸籽粉末。