[发明专利]一种干细胞培养瓶支架装置及使用方法

说明书

本发明涉及干细胞领域，具体提供一种干细胞培养瓶支架装置及使用方法。该支架装置由侧支架和活动支架组成，侧支架为固定不动架子，起到整体支撑作用。活动支架设有固定挡板和滑块组成的可调节大小的培养瓶存放区，可沿一侧连在侧支架上的轴顺时针和逆时针旋转10度，起到摇晃混匀培养瓶和使其中的液体集中在底部的作用；活动支架分三层，每层可放四个培养瓶。使用时将培养瓶置于活动支架的培养瓶放置区，然后整体置于生物安全柜和超净工作台中，利用活动支架的可旋转性完成废液的移除、加液的混匀、细胞的收集等。本培养瓶支架系统可有效辅助完成批量培养瓶换液、细胞传代和收集操作，使整个过程便利化，节约大量时间。

所属领域

本发明属干细胞领域，具体涉及一种干细胞培养瓶支架装置及使用方法。

背景技术

随着间充质干细胞存储建库和临床应用研究的开展，批量扩增已成为干细胞生产的主要方式。当前，间充质干细胞批量扩增有多种可供选择的方式，如细胞工厂、3D微载片悬浮培养等，但培养瓶培养因其操作简单、安全性高等优势仍是当前最主要方式。每次操作培养瓶数量从十几瓶到几十瓶不等。常规条件下，每个培养瓶在细胞传代或收集过程中都要进行如下操作：拿起瓶子、倒掉培养基、加入清洗液清洗、倒掉清洗液、加入胰酶消化(摇匀)、放下瓶子、吹起细胞和将细胞转移到离心管中等，中间重复操作不仅费时，而且费力，成为培养瓶规模化培养中亟待解决的问题。

发明内容

本发明提供一种细胞培养瓶支架装置及使用方法，该装置由侧支架(4)、活动支架(5)组成，可同时放置12个培养瓶供操作。该装置可对不同规格的培养瓶实现批量操作：去上清、细胞清洗、加酶混匀等操作，整个过程方便快捷，节约大量时间。

上述侧支架(4)为固定支架，位于培养瓶支架两端；每个由长方形底座和长方形竖板组成，竖板上平行底板排列有三组孔，每组两孔，一孔为圆形，用于连接活动支架的后轴，起固定活动支架和为其提供旋转支撑的孔；另一孔为弧形孔，为活动支架转轴螺杆(12)连接位置，活动支架转轴螺杆可在其中沿弧线上下移动，调节活动支架倾斜位置。整个侧支架起到固定培养瓶支架的作用。

上述活动支架(5)由三根有槽滑竿组成，滑竿上设有固定挡板(1)和滑块 (2)，每个固定挡板和对应滑块形成一个可调节的培养瓶存放位置，固定挡板不能移动，滑块可在滑槽上移动，调节滑块与固定挡板之间的距离从而可以适合放置不同大小培养瓶，每个活动支架可放四个培养瓶。

上述活动支架沿长轴两侧各有一轴，后轴两端放置在固定支架上，前轴为活动支架转轴螺杆，可在固定支架上的弧形槽中移动，使整个活动支架以后轴为中心顺时针、逆时针旋转，调节活动支架的倾斜位置。

活动支架共有三组，每组可放置4个培养瓶，三组共可放12个培养瓶。

上述使用方法，包括如下步骤：

1)调整活块位置，使滑块与固定挡板间的大小适合培养瓶的尺寸。

2)将培养瓶从孵箱中取出，放置在架子上，转移至生物安全柜或超净工作台中。

3)打开培养瓶，逆时针移动活动支架转轴螺杆使培养品倾斜一定角度、培养液集中于瓶底，用移液管移去所有培养基。

4)加入生理盐水或PBS，顺时针、逆时针移动活动支架转轴螺杆2-3次清洗细胞，止于逆时针移动活动支架转轴螺杆使培养瓶倾斜一定角度、培养液集中于瓶底，用移液管移去所有培养基。

5)加入消化酶，顺时针、逆时针移动活动支架转轴螺杆2-3次使消化酶均匀分布在整个培养瓶中，止于活动支架成水平位置，室温孵育消化3-5分钟。

6)加入血清，顺时针、逆时针移动活动支架转轴螺杆2-3次使血清均匀分布在整个培养瓶中终止消化，止于逆时针移动活动支架转轴螺杆使培养瓶倾斜一定角度、液体集中于瓶底。

7)用移液管吹打使细胞从瓶壁上脱落分散到液体中，吸出细胞悬液。