[发明专利]一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法

说明书

本发明属于药物分析检测技术领域，具体涉及一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法。该方法可以在一个色谱条件下同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶‑3‑磺酸、吡啶‑3‑磺酸甲酯、吡啶‑3‑磺酸乙酯3种杂质，各色谱峰的分离度均较好，检测限、定量限也均符合药物的定性和定量分析要求，灵敏度高，且具有较高的回收率、精密度和稳定性，重现性好、准确性高，可用于富马酸伏诺拉生中生产过程中对杂质的监控，有利于控制、提高富马酸伏诺拉生的质量；同时操作简单，检测时间短，非常适用于大规模产业化生产中对原料药的质量监控。

技术领域

本发明属于药物分析检测技术领域。更具体地，涉及一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法。

背景技术

富马酸伏诺拉生(1-[5-(2-氟苯基)-1-(吡啶-3-基磺酰基)-1H-吡咯-3-基]-N-甲基甲胺单富马酸盐)是一种新型的质子泵抑制剂，主要用于治疗酸相关胃肠道疾病，如胃溃疡、胃食管反流症等。吡啶-3-磺酰氯是合成富马酸伏诺拉生的关键起始物料，也是一种强氧化剂，化学性质活泼，易水解生成吡啶-3-磺酸，同时，吡啶-3-磺酰氯还会与合成工艺中用到的甲醇、乙醇溶剂反应，生成潜在基因毒性杂质吡啶-3-磺酸甲酯和吡啶-3-磺酸乙酯；另一方面，富马酸伏诺拉生本身也可降解得到吡啶-3-磺酸。

富马酸伏诺拉生制备过程中存在的吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯副产物杂质会被带入到成品中，无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效，甚至存在遗传毒性，直接引起DNA损伤，导致DNA突变，从而引发癌症，存在安全隐患。因此，迫切需要提供一种检测富马酸伏诺拉生中杂质的分析方法。但是，吡啶-3-磺酸沸点在330℃以上，超过绝大多数气相色谱柱的温度范围，因此不适合用气相色谱法(CG)来测定；并且，磺酸酯的反应活性较高，利用GC检测时磺酸酯会在进样口高温分解或者样品中的磺酸与醇类溶剂瞬间反应生成磺酸酯。而采用HPLC法测定时，样品中残留的磺酸易与测试中常用到的醇类溶剂发生反应，生成待测的磺酸酯，造成假阳性结果，影响测定结果的准确性；并且磺酸酯类杂质极性大，在色谱柱中保留弱，能容易被洗脱下来而导致杂质之间无法有效分离。如乐志艳等(乐志艳,肖敏,方潇颖.HPLC法测定富马酸沃诺拉赞原料药中吡啶-3-磺酸的含量[J].今日药学,2019,v.29(01):23-26.)公开了一种HPLC法测定富马酸沃诺拉赞原料药中吡啶-3-磺酸的含量，在选定的色谱条件下，吡啶-3-磺酸与相邻色谱峰分离良好，峰面积呈现良好的线性关系，精密度良好，灵敏度高，准确度好，但是该方法仅能检测吡啶-3-磺酸，吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯没有响应值，无法同时检测。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术无法用CG或HPLC同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯3种杂质方法的缺陷和不足，提供一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯3种杂质的检测方法。

本发明的目的是提供一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯3种杂质的检测方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯3种杂质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，

其中，所述吡啶-3-磺酸、吡啶-3-磺酸甲酯、吡啶-3-磺酸乙酯的结构如下所示：

其中，高效液相色谱条件为：

采用十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱，在260nm检测波长，25～45℃柱温，0.8～1.2ml/min流速条件下，以0.02～0.05mol/L磷酸氢二钾溶液作为流动相A，以乙腈作为流动相B，在梯度洗脱条件下进行检测。