[发明专利]一种用于强极性药物分离的硅胶基质色谱填料的制备方法

说明书

本发明属于新型色谱填料制备领域，公开了一种用于强极性药物色谱分离的硅胶基质色谱填料的制备方法，包含步骤：将硅胶采用稀硝酸浸泡处理，并对其表面的硅羟基进行活化；在硅胶表面修饰双键；以核苷类药物作为模板分子，制备预聚合体系；向预聚合体系中加入引发剂、交联剂以及双键修饰的硅胶，使硅胶表面发生印迹聚合反应；采用有机溶剂对聚合反应所得硅胶进行洗脱，除去模板分子，得到印迹聚合物包覆的多孔硅胶微球。本发明将分子印迹聚合物优异的选择性与硅胶材料良好的孔结构、形貌特征、机械强度等性质相结合，通过反应条件控制，使所得色谱填料既具有较高的色谱分离柱效、较高的分离选择性、良好的色谱峰对称性，又具有良好的分离重现性。

技术领域

本发明属于新型色谱填料制备领域，尤其涉及一种用于强极性药物色谱分离的硅胶基质色谱填料的制备方法。

背景技术

近期，随着生物医药行业的不断发展，强极性药物(人参皂苷类、核苷类、糖类氨基酸、生物碱类等)引起科研工作者的广泛关注。对强极性药物进行分离分析，对提高药物安全性及分析药物代谢过程等具有重要意义。

如今，在强极性药物的众多分析检测方法中，高效液相色谱法最为常用，然而，传统的反相色谱柱难以对其有效分离。因此，发展新型色谱分离材料具有重要的意义。目前，为了解决强极性药物的色谱分离难题，研究者发展了一系列新型色谱固定相，包括离子液体修饰多孔硅胶、碳点修饰多孔硅胶及聚合物修饰多孔硅胶等新型色谱分离材料，例如CN101757897A公开了一种壳寡糖亲水色谱固定相的制备方法，采用“链接化学”作为键合反应方法键合壳寡糖，首先在硅胶表面引入末端炔基，然后以水、甲醇或这些溶剂的混合体为反应溶剂，将修饰有叠氮基团的壳寡糖键合到硅胶表面，即得壳寡糖亲水色谱固定相。

然而，强极性药物仍难以有效分离。因此，发展选择性独特的新型液相色谱固定相，对解决上述问题具有重要意义。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种用于强极性药物色谱分离的硅胶基质色谱填料的制备方法。

为实现以上目的，本发明提供的一种用于强极性药物色谱分离的硅胶基质色谱填料的制备方法，采用如下技术方案：

一种用于强极性药物分离的硅胶基质色谱填料的制备方法，包含以下步骤：

1)硅胶选择及活化处理：选取粒径2～5μm、孔径15～30nm的多孔硅胶微球作为载体，采用质量分数8～20％的稀硝酸对多孔硅胶微球进行浸泡处理后，采用去离子水洗涤至上清液呈中性，再采用无水乙醇洗涤1～3次，烘干；

2)硅胶表面修饰双键：以无水甲苯为反应介质，加入乙烯基或丙烯基硅烷化试剂，加热回流8～24h，依次采用无水甲苯和乙醇或甲醇进行洗涤，得到双键修饰的多孔硅胶微球，干燥；

3)预聚合体系构建：选取一种或两种及以上核苷类药物作为模板分子，以甲基丙烯酸或丙烯酰胺作为功能单体，以甲醇、乙醇或乙腈作为致孔剂，-5～10℃下预聚合5～20h，得到预聚合体系；

4)聚合反应：向预聚合体系中缓慢添加(液体约1～5秒一滴，固体约1～5秒10毫克)引发剂、交联剂和双键修饰的多孔硅胶微球，在30～70℃条件下反应12～48h；

5)模板分子洗脱：采用洗脱溶剂对色谱分离材料洗脱6～18次，烘干备用。

优选的，所述步骤1)中，采用真空烘箱进行烘干，所述真空烘箱温度设置为50～100℃，时间5～16h。

优选的，所述步骤2)中，采用所述甲苯洗涤2～5次，采用所述甲醇或乙醇洗涤2～5次。

优选的，所述步骤2)中，采用加热干燥，所述加热干燥温度为50～80℃，时间为6～16h。