[发明专利]一种固态大曲中尿素含量的检测方法

说明书

本申请公开了一种固态大曲中尿素含量的检测方法，其特征在于，包括：提取固态大曲样品中的尿素组分得到尿素提取液；基于所述尿素提取液配制得到尿素样品液；配制一系列具有浓度梯度的尿素标准液，采用高效液相色谱荧光检测法对各所述尿素标准液进行分析，绘制表征峰面积与尿素浓度之间关系的标准曲线；采用高效液相色谱荧光检测法对所述尿素样品液进行分析，并根据所述标准曲线确定所述尿素样品液中的尿素浓度。本申请的检测方法，样品净化简单、便捷、成本低，仪器分析时间短，能够准确定量检测固态大曲中的痕量尿素含量，从而解析白酒固态发酵过程中氨基甲酸乙酯的形成途径，更好地管控白酒品质安全性。

技术领域

本申请涉及化学检测领域，更具体涉及一种固态大曲中尿素含量的检测方法。

背景技术

白酒固态发酵过程中氨基甲酸乙酯的形成机理和调控措施是白酒领域研究热点，通过研究发酵过程酒醅中的氨基甲酸乙酯(Ethyl Carbamate，EC)及其相关前体物质，发现尿素是EC的主要前体物质。

目前，国内外关于大曲中尿素含量的研究较少，关于尿素的检测方法主要有直接比色法，间接比色法和色谱法。直接比色法操作简便，易于实现，但容易受色素等物质影响且灵敏度较低，如二乙酰肟比色法、对二甲氨基苯甲醛比色法、邻苯二甲醛比色法、亚硝酸盐-格里斯试剂法等；间接比色法简单快速，但是检测成本高，受样品内源性物质影响较大，如酶偶联法、脲酶-波氏比色法、酶电极法、甲酚红法、邻甲酚酞络合剂法、ATP水解法等。色谱法具有选择性好，灵敏度高，准确性高等特点，运用液相色谱法检测葡萄酒、黄酒、白酒和尿液中尿素含量均取得了理想的结果。

但该研究过程研究对象主要集中在酒醅和酒中，无法解析大曲发酵过程中有氨基甲酸乙酯的生成机理。另外，对大曲等固态基质样品的前处理方法通常操作复杂，精确度较差。

发明内容

本申请的目的是提供一种能够在白酒固态发酵过程中对固态基质中的尿素进行操作简单、定量准确的检测的固态大曲中尿素含量的检测方法。

为达成上述目的，本申请所采用的技术方案如下：

在一些实施例中，本申请的检测方法，包括如下步骤：提取固态大曲样品中的尿素组分得到尿素提取液；基于尿素提取液配制得到尿素样品液；配制一系列具有浓度梯度的尿素标准液，采用高效液相色谱荧光检测法对各尿素标准液进行分析，绘制表征峰面积与尿素浓度之间关系的标准曲线；采用高效液相色谱荧光检测法对尿素样品液进行分析，并根据标准曲线确定尿素样品液中的尿素浓度。

在一些实施例中，使用提取试剂对固态大曲样品进行提取。在一些实施例中，提取试剂为水、甲醇溶液、乙腈溶液和乙醇溶液中的至少一种。在一些实施例中，提取试剂为乙醇溶液。

在一些实施例中，乙醇溶液的体积浓度在40％到100％之间。在一些实施例中，乙醇溶液的体积浓度为40％、60％、80％和100％中的至少一种。在一些实施例中，乙醇溶液的体积浓度为80％。

在一些实施例中，尿素提取液经过超声波萃取处理。在一些实施例中，超声波萃取的时间在15分钟到60分钟之间。在一些实施例中，超声波萃取的时间为15分钟、30分钟、45分钟和60分钟中的至少一种。在一些实施例中，超声波萃取的时间为45分钟。在一些实施例中，超声波萃取的温度在30℃到70℃之间。在一些实施例中，超声波萃取的温度为60℃。

在一些实施例中，尿素提取液经过净化处理。在一些实施例中，净化处理包括使用活性炭进行色素脱除处理。在一些实施例中，每2毫升的未脱色尿素提取液中加入0.1克到0.6克的活性炭进行色素脱除处理。在一些实施例中，每2毫升的未脱色尿素提取液中加入0.1克、0.2克、0.4克、0.6克中的至少一种质量的活性炭进行色素脱除处理。在一些实施例中，每2毫升的未脱色尿素提取液中加入0.2克的活性炭进行色素脱除处理。