[发明专利]一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法

说明书

本发明提供了一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法，涉及一种动物模型的造模方法。该造模方法是通过3次以上超促排卵的方法造模；每两次超促排卵之间间隔2天。本发明采用反复超促排卵的方法成功建立了肾精不足伴生殖功能低下的动物模型，该模型可以用于肾精不足伴生殖功能低下相关疾病的研究，也可以用于对补肾、养精、助孕的药物进行筛选。同时，本发明造模方法中每次超促排卵间隔仅需两天，极大缩短了造模时间，降低了造模成本，利于推广应用，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种动物模型的造模方法，具体涉及一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法。

背景技术

肾为先天之本，天癸之源，冲任之本。《素问·六节藏象论》曰：“肾者主蛰，封藏之本，精之处也。”《素问·上古天真论》曰：“女子七岁，肾气盛，齿更发长；二七而天癸至，任脉通，太冲脉盛，月事以时下，故有子”。《医学入门·求嗣》曰：“男精女血，皆兼气血阴阳，总属肾与命门。精血充盛，别无杂病，宜交会得时，乃成胎孕”。肾精是机体生命活动之根，生殖繁衍之本。

肾精不足又有肾精亏虚、肾精气亏虚，肾精亏损的说法，以小儿生长发育迟缓，成人生殖机能减退，早衰，耳鸣，发脱，牙齿松动，健忘等为常见症的证候。肾精亏虚多数是由于老年体衰，肾的精气亏损，或先天禀赋不足，或因久病耗损、后天失养所致。其病理表现为在婴幼儿时期可能影响生长发育；在青年时期，可能导致早衰、性功能减退而见滑泄、阳痿等。肾精亏虚通常表现为眩晕耳鸣，腰膝酸软，性功能减退，男子精少，女子“天癸”早竭，过早衰老，神疲健忘，舌淡苔少，脉沉细等多种病状。

建立肾精不足的动物模型对于研究肾精不足机理、筛选治疗肾精不足的药物具有重要意义。目前，制备肾精不足动物模型主要以小鼠为对象，主要使用药物造模、手术造模、病因造模等方式。

药物造模由于操作简便，成为建立肾精不足模型最常用的方法。药物造模主要使用糖皮质激素、具有生殖损害的药物进行造模。如康天济(补肾实骨汤治疗糖皮质激素性骨质疏松的实验研究.哈尔滨:黑龙江中医药大学,2008.)、刘雁飞(中药对糖皮质激素所致大鼠骨质疏松的影响.中国地方病防治杂志,2009,24(2):110-111.)等使用地塞米松、强的松制备肾精不足所致骨质疏松模型。王浩(益肾调周法对卵巢早衰模型大鼠β-内啡肽的影响.针灸临床杂志,2012,28(6):59-63.)使用环磷酰胺腹腔注射，制备肾虚大鼠卵巢功能衰竭的模型。由于肾精不足涉及的疾病较多，这些方法只能针对特定症状和疾病，如肾精不足致骨质疏松、卵巢功能衰竭等，并不能作为肾精不足伴生殖功能低下的动物模型，使其使用受到限制。

发明人前期研究(《资冲颗粒对反复促排卵小鼠卵母细胞质量影响的分子机制研究》)发现，反复超促排卵导致肾精亏虚，因此通过反复超促排卵建立了一种肾精不足、生殖功能低下的模型来评价药物资冲颗粒的疗效。但是，该方法造模时间长，成本高，应用推广受限。

因此研究一种造模时间短、成本低、效果好的肾精不足伴生殖功能低下的动物模型，对于肾精不足的研究有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法。

本发明提供了一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法，它是通过3次以上超促排卵的方法造模；每两次超促排卵之间间隔2天。

进一步地，所述的造模方法是对雌性小鼠进行3次以上超促排卵。

进一步地，所述的造模方法是对雌性小鼠进行3～5次超促排卵；

优选地，它是对雌性小鼠进行5次超促排卵。

进一步地，所述每次超促排卵采用药物孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素。

进一步地，所述每次超促排卵采用注射孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素的方法。