[发明专利]4,4’-二甲氧基查耳酮在延缓卵母细胞体内外老化中的应用

说明书

本发明公开了4,4’‑二甲氧基查耳酮在延缓卵母细胞体内外老化中的应用。4，4’‑二甲氧基查尔酮在制备延缓卵母细胞体外老化进程的试剂中的应用。4，4’‑二甲氧基查尔酮在制备改善生殖衰老的药物中的应用。本发明结果都表明DMC能够有效改善体外老化MII期卵母细胞质量，且体外受精实验验证培养基内添加DMC能有效提高老化MII期卵母细胞受精率和囊胚发育率。小鼠体外老化MII卵母细胞培养液中加入DMC，可有效延缓MII期卵母细胞体外老化进程，提高卵母细胞质量，高龄小鼠口服DMC能有效提高排卵数。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及4,4’-二甲氧基查耳酮在延缓卵母细胞体内外老化中的应 用。

背景技术

卵母细胞的质量受到许多因素的影响，包括生活方式、环境和年龄等，其中年龄所致的卵 母细胞质量下降是最主要且无法抗拒的因素。在女性晚婚晚育的社会大背景的推动下，与年龄 有关的生育问题的影响越来越普遍。众所周知，女性生育力随着年龄增长显著下降，到35岁 左右生育力急剧下降，这种与年龄有关的女性不育以卵巢功能逐渐下降为特征，与卵巢内卵母 细胞数量的减少和质量的下降密切相关。高龄女性卵子质量的下降不仅导致不孕症发生率增 加，还会导致染色体异常、胚胎停育、自然流产以及出生缺陷等发生率显著增高，严重危害了 女性生殖健康。

卵母细胞老化存在两种形式，一种为体内老化，一种为成熟后(排卵后)卵母细胞老化。 卵母细胞存在于卵巢中，由于卵巢衰老引起的卵母细胞老化为体内老化，体现为年龄相关的卵 母细胞质量下降，该老化卵母细胞包括衰老卵巢内的未成熟卵母细胞和从衰老卵巢中排出的成 熟卵母细胞；排卵后卵母细胞老化是由于在哺乳动物中，排卵后的成熟卵母细胞阻滞在第二次 减数分裂的中期等待受精。卵母细胞受精存在一个最佳的时间窗，若排卵后卵母细胞长时间未 受精，即会发生成熟后(排卵后)卵母细胞老化(Postovulatory aging，POA)，会损害卵母 细胞的质量和受精后的胚胎发育，该类型的体外卵母细胞老化与年龄无关，而与排卵后的体外 存放时间有关。一方面，在人和某些灵长动物中，由于没有可见的排卵迹象，因而没有适当的 机制来确保精子输送到雌性生殖道和排卵的同步性，进而增加了体内老化的卵母细胞和新鲜的 精子受精的可能性；另一方面，更多的情况是在体外环境下的辅助生殖技术(assisted reproductive technologies，ART)过程中，卵母细胞在受精前往往不可避免地要经过长时间 的培养。比如，对受精失败的卵母细胞进行补救性ICSI(Intracytoplasmic sperm injection， 卵胞浆内单精子显微注射技术)。POA会引起一系列生化和分子的改变，如活性氧(reactive oxygen species，ROS)的积累、抗凋亡蛋白BCL2表达的减少、caspase的激活、成熟促进因 子(maturation-promoting factor，MPF)的表达降低等，此外，这一过程还会引起一系列类 似于与年龄相关的卵巢衰老所致卵母细胞质量下降的功能结构缺陷，如纺锤体形态异常，染色 体完整性缺失、线粒体功能障碍等，这些变化都会严重损害卵母细胞质量，导致受精能力下降、 胚胎质量低下，增加早期妊娠丢失的风险，甚至影响子代的健康，ART的不良结局也常与POA 有关。

虽然卵巢衰老和排卵后卵母细胞老化导致的一系列卵母细胞质量改变的表现已基本确定， 目前也仅发现少数有效的饮食或药理学干预措施能够部分缓解/逆转老化造成的卵母细胞质量 改变，而且这些干预措施的安全性和临床应用前景还有待考量。比如，一项单中心、横切性的 回顾性研究结果显示，在胚胎移植周期补充白藜芦醇与临床怀孕率下降和流产风险增加密切相 关。因此目前迫切需要开发安全且有效延缓/逆转卵母细胞老化的新方法。