[发明专利]使用串联质谱同时检测多种代谢物的方法

权利要求书

1.一种使用串联质谱同时检测多种代谢物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、提供氨基酸混合内标溶液、肉碱混合内标溶液和其他混合内标溶液，所述其他混合内标溶液包括²H₄-C26:0-LPC、¹⁵N₂-乳清酸和¹³C₅-MPP³；

S2、获取代谢物作为样品，所述代谢物包括氨基酸、游离和酰基肉碱、溶血卵磷脂酰胆碱、琥珀酰丙酮、极长碳链的酰基肉碱和乳清酸中的一种或多种，使用提取液从所述样品中提取所述代谢物；

S3、使所述代谢物和所述内标溶液离子化以产生离子；

S4、多反应监测模式下在质谱图中获得一种或多种离子的质荷比；

S5、在多反应监测模式下确定乳清酸的信号强度；

S6、使用对应于以上代谢物的稳定同位素标记的内标溶液，检测和定量乳清酸的量。

2.如权利要求1所述的使用串联质谱同时检测多种代谢物的方法，其特征在于，所述S2中的取样过程如下：将质控血片和样本血片在96孔萃取板排序，用打孔器顺序将血片打入V型截底96孔萃取板中；将含内标溶液和琥珀酰丙酮样本前处理液的萃取液分别加入到96孔板的反应孔中，萃取样本；用粘性贴膜密封孔板，在孵育震荡仪中进行震荡。

3.如权利要求1所述的使用串联质谱同时检测多种代谢物的方法，其特征在于，所述氨基酸包括丙氨酸、精氨酸、瓜氨酸、甘氨酸、亮氨酸/异亮氨酸/羟基脯氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸和/或缬氨酸；

所述游离和酰基肉碱包括游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丙二酰肉碱/3-羟基-异戊酰肉碱、异戊酰肉碱、异戊烯酰肉碱、戊二酰肉碱/3-羟基-己酰肉碱、己酰肉碱、己二酰肉碱、辛酰肉碱、辛烯酰肉碱、癸酰肉碱、癸烯酰肉碱、癸二烯酰肉碱、十二碳酰肉碱、十二碳烯酰肉碱、十四碳酰肉碱、十四碳烯酰肉碱、十四碳二烯酰肉碱、3-羟基-十四碳酰肉碱、十六碳酰肉碱、十六碳烯酰肉碱、3-羟基-十六碳酰肉碱、3-羟基-十六碳烯酰肉碱、十八碳酰肉碱、十八碳烯酰肉碱、十八碳二烯酰肉碱、3-羟基-十八碳酰肉碱和/或3-羟基-十八碳烯酰肉碱；

所述极长碳链的酰基肉碱包括C20-脂酰肉碱、C22-脂酰肉碱、C24-脂酰肉碱和/或C26-脂酰肉碱；

所述溶血卵磷脂酰胆碱包括C20-LPC、C22-LPC、C24-LPC和/或C26-LPC。

4.如权利要求1所述的使用串联质谱同时检测多种代谢物的方法，其特征在于，所述提取液由甲醇、水和羧酸组成，所述甲醇的体积含量为50％-100％，羧酸浓度为0.05-1mol/L，溶剂为水，所述羧酸选自甲酸、乙酸和草酸中的一种或其组合。