[发明专利]一株变形假单胞菌fliG基因沉默菌株及其应用

说明书

本发明提供了一株变形假单胞菌fliG基因沉默菌株及其应用。所述菌株为Pseudomonas plecoglossicidafliG‑RNAi，已于2020年12月18日于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M 2020917。变形假单胞菌fliG基因沉默菌株与野生菌株相比，鞭毛变短，运动能力、趋化性、粘附能力和生物膜形成能力均减弱；对斜带石斑鱼的致病力极显著下降，而且能够引起感染脾脏中变形假单胞菌和斜带石斑鱼转录组发生显著变化。该菌株能用于研究变形假单胞菌的致病机理，尤其是fliG基因在病原‑宿主互作中的功能。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，更具体涉及一株变形假单胞菌  fliG基因沉默菌株及其应用。

背景技术

变形假单胞菌 (Pseudomonas plecoglossicida)是一种革兰氏阴性需氧杆状菌，具有极生鞭毛，可引起养殖鱼类“内脏白点病”，造成严重的经济损失。

鞭毛是细菌运动所必需的重要器官。鞭毛运动可以使细菌更好地适应环境变化，从而避免有害条件，使细菌能够成功地与其他微生物竞争。此外，鞭毛还在细菌粘附、定殖、入侵、趋化性、生物膜形成和蛋白质输出等许多方面发挥重要作用。其对上述生物过程的影响大大增强了细菌的致病性，例如鞭毛通过III型分泌系统输出毒力因子，进一步促进细菌粘附；通过介导运动、生物膜形成和趋化性，从而影响细菌的毒性。鞭毛的合成和组装是一个有序的级联过程，需要50多个基因来协调和合作。 fliG是细菌鞭毛运动的转子蛋白，由 fliG_N、 fliG_M和 fliG_C三个结构域组成。它与 fliM和 fliN形成鞭毛C环，并调节鞭毛的旋转方向，从而控制运动行为。有文献证明， fliG基因沉默导致钩端螺旋体活性和致病性降低。 fliG基因的同源重组敲除导致伯氏疏螺旋体的运动性降低，并有效地防止了病原菌的传染性。近年来，对 fliG基因的研究主要集中在细菌鞭毛旋转方向中的作用，但对致病性的研究却非常有限，对 fliG基因在病原-宿主相互作用中的研究也未见报道。因此，探明变形假单胞菌 fliG基因在病原-宿主相作中的功能能够揭示其对变形假单胞菌致病性的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一株变形假单胞菌 fliG基因沉默菌株及其应用，揭示 fliG基因在生物学过程以及转录组层面对变形假单胞菌毒力的影响，明确该菌株的应用范围。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：