[发明专利]EGFR的改造的结合蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种EGFR的改造的结合蛋白及其应用。该EGFR的改造的结合蛋白是氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的改造的结合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的改造的结合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的改造的结合蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的改造的结合蛋白中的至少一种。EGFR的改造的结合蛋白具有高度亲和力、特异性和低免疫原性，并且具有较好的稳定性，结构简单，易于进行大规模生产等优点，可更好地应用于结合蛋白药物的开发。

技术领域

本发明属于结合蛋白领域，涉及一种EGFR的改造的结合蛋白及其应用。

背景技术

由于传统的癌症治疗方法存在脱靶、癌组织中药物浓度不足和严重的系统毒性甚至耐药性等缺点。为了解决这些问题，可以采用靶向治疗癌症，即使用结合蛋白特异性的靶向肿瘤细胞表面蛋白分子，从而抑制肿瘤细胞的活性。

EGFR是一种170kDa的跨膜蛋白，参与调节多种类型细胞的生长和分化。近年研究发现，EGFR在大多数人类恶性肿瘤中均过度表达，并与不良预后相关。异常过表达的EGFR被激活后，会导致其下游信号通路活化，从而促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、血管生成和抑制凋亡等作用。因此，EGFR成为癌症治疗的极好靶标。

本发明采用的EGFR结合蛋白对照是一种只含有单个结构域的基因工程抗体，分子量约为15kDa，具有良好的溶解性、高稳定性、良好的组织穿透性等优点，使其在诊断和靶向治疗肿瘤等方面有广阔的前景。但是，越来越多证据表明，由于EGFR信号传导途径活化的复杂机制，及其自主性和依赖性，因此有必要对结合蛋白进行改造来实现治疗过程中的协同效应。因此，对EGFR结合蛋白改造得到的改造的蛋白，拥有广阔的应用前景和具有极高的医学价值。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种EGFR的改造的结合蛋白。

本发明的另一目的在于提供上述EGFR的改造的结合蛋白的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种EGFR的改造的结合蛋白，是名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12的改造的结合蛋白、名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12-PE的改造的结合蛋白、名称为pcDNA3.1-aEG4D9-aEG4D9的改造的结合蛋白和名称为pcDNA3.1-aEG4D9-anti-CD3-aEG4D9的改造的结合蛋白中的至少一种；

所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12的改造的结合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示；

所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12-PE的改造的结合蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示；

所述的名称为pcDNA3.1-aEG4D9-aEG4D9的改造的结合蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.3所示；

所述的名称为pcDNA3.1-aEG4D9-anti-CD3-aEG4D9的改造的结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

上述EGFR的改造的结合蛋白的编码核苷酸序列，是编码所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12的改造的结合蛋白的核苷酸序列、编码所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12-PE的改造的结合蛋白的核苷酸序列、编码所述的名称为pcDNA3.1-aEG4D9-aEG4D9的改造的结合蛋白的核苷酸序列和编码所述的名称为pcDNA3.1-aEG4D9-anti-CD3-aEG4D9的改造的结合蛋白的核苷酸序列中的至少一种核苷酸序列。

编码所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12的改造的结合蛋白的核苷酸序列优选如SEQ ID NO.9所示。

编码所述的名称为pET22b-aEG4D9-aEG2E12-PE的改造的结合蛋白的核苷酸序列优选如SEQ ID NO.10所示。