[发明专利]一株用于抑制植物病原真菌的产芽孢解淀粉芽孢杆菌及其菌剂和应用

说明书

本发明涉及微生物学和生物技术，具体公开了一株用于抑制植物病原真菌的产芽孢解淀粉芽孢杆菌及其在果蔬采后保鲜中应用。本发明提供的解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）M73，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC NO.15464，保藏日期：2018年3月20日。该菌株通过诱变选育得到，具有广泛的抑菌谱和高抑制率。其发酵液、抑菌物质及采用其发酵液制备制剂用于防治软枣猕猴桃果腐病及其它真菌病害，具有效果好、可产业化生产，制备工艺简单，使用方法简单、无毒、无污染，绿色环保等优点。

技术领域

本发明涉及微生物学和生物技术，特别是一株用于抑制植物病原真菌生长的解淀粉芽孢杆菌M73及其在拮抗软枣猕猴桃采后病原菌中的应用。

背景技术

农业生产中真菌病害是一个常见的问题，真菌病害不仅会感染作物造成减产，甚至绝收，影响产品品质，而且会侵染采后的农产品，造成采后损失。植物病原真菌对植物的侵染除了会造成严重的经济损失，一些真菌产生的真菌毒素（如黄曲霉毒素B1等）会在食物中残留，严重威胁人们健康。世界各国每年农作物仓储中会有25-50%受到真菌侵染，可造成高达30%的仓储损失。使用化学杀菌剂是当前最常用的手段，化学杀菌剂可以很好的抑制或杀灭病原菌，起到很好的防治效果。然而，化学杀菌剂也存在许多不足。化学杀菌剂大部分会进入环境，污染环境水体，威胁其它生物，影响生态平衡。另外化学农药的作用机制固定，会使病原菌产生抗性。此外化学杀菌剂大多对人和动物有害，用于农产品会在植物的营养生长中积累，最终在农产品中产生化学农药残留，这可能会导致致癌、致畸以及致死的后果。

目前，已经开发出多种新的方法用于抑制植物病原真菌生长。生物农药便是很有希望的绿色农药。而产芽孢的芽孢杆菌属细菌可能是最有效的用于植物保护的生物杀菌剂之一。芽孢杆菌可以合成许多生物活性物质，这些物质可以抑制植物病原真菌的生长。芽孢杆菌杀菌剂的优点包括：可以高效的抑制病原菌，具有多种多样的抗菌机制，可以诱导植物的系统抗性，可以促进植物的生长，具有形成生物被膜的能力，从而阻止植物病原真菌进入食物和传播。产芽孢的细菌，与其它的生物活性产品相比具有许多生物技术上的优势。如专利文献CN 105349459A公开了一种解淀粉芽孢杆菌及其应用。所获得的解淀粉芽孢杆菌GB1，分离自黄瓜老茎，该菌株具有的广谱抑菌作用，其能够抑制病原真菌分生孢子萌发、菌丝生长，并定植于伤口形成生物膜，有效阻止病原菌的侵染，抑制植物病原菌以及其他有害微生物的侵染繁殖，并具有促进植物生长的机制，产生植物激素促进植物生长发育，进而增加产量，但其抑菌能力有限。目前能够高效拮抗植物病原真菌的生防制剂还很少，因此筛选、选育出一种能够高效拮抗植物病原菌的微生物菌株，并制成微生物菌剂，通过生物防治的方式降低植物病害给农业生产带来的危害，非常必要。目前一种新型的常压室温等离子体(ARTP)诱变技术的兴起微生物的育种提供了便利。

猕猴桃是呼吸跃变型水果，在果实成熟过程中存在呼吸速率的突然升高，乙烯合成显著增加，果实急速变软，糖分迅速增加。成熟后的猕猴桃因其高糖分，柔软果实极易破损，极不耐储运。近年来一种新的猕猴桃——软枣猕猴桃开始进入市场，与普通常见的美味猕猴桃、中华猕猴桃不同，软枣猕猴桃光滑无毛，果皮薄可以带皮食用，并且风味浓郁。软枣猕猴桃因为其食用方便，营养丰富，风味极佳，并且不易保存的特点在欧美市场上价格极高。因为其极高的价值和市场潜力，今年来软枣猕猴桃开始在我国大量栽培，软枣猕猴桃也是四川地区猕猴桃产区升级换代的主要品种之一。

软枣猕猴桃因为其光滑无毛，皮薄的特性在生长采摘和储运过程中，非常容易损伤表皮，又因为呼吸跃变的成熟方式，常温下很快成熟变软，因而极易腐烂，货架期极短，目前除电商空运直送外，市场很难见到。

甲基环丙烯（1-MCP）是一种乙烯拮抗剂，可以竞争性结合乙烯受体，阻断乙烯作用，延缓果实的成熟，因而广泛用于果蔬、花卉的保鲜。